Terima kasih telah mengunjungi Alam.com.Versi browser yang Anda gunakan memiliki dukungan CSS yang terbatas.Untuk pengalaman terbaik, kami menyarankan Anda menggunakan browser yang diperbarui (atau nonaktifkan Mode Kompatibilitas di Internet Explorer).Sementara itu, untuk memastikan dukungan yang berkelanjutan, kami akan merender situs tanpa gaya dan JavaScript.
Gangguan stres pasca-trauma (PTSD) ditandai dengan penurunan kemampuan untuk menetralkan respons rasa takut terhadap isyarat yang terkait dengan trauma.Studi manusia dan hewan menunjukkan perbedaan dalam keterlibatan area tertentu dari korteks frontal sebagai mediator kunci yang menentukan keberhasilan penekanan rasa takut, tetapi interaksi sirkuit saraf yang menentukan keterlibatan diferensial dari area ini tidak jelas.Untuk lebih memahami bagaimana perbedaan individu dalam ingatan kepunahan tercermin dalam perbedaan dalam aktivitas sirkuit saraf, kami memberi label proyeksi dari korteks sublimbik tikus (IL) dengan pelacak retrograde dan membandingkan proyeksi saraf di dalam dan di luar neuron proyeksi IL.Kami menganalisis data ini, mengelompokkannya sesuai dengan tingkat pelestarian memori yang memudar pada tikus.Kami menemukan bahwa dalam sel yang memproyeksikan IL, neuron di parathalamus posterior menunjukkan aktivitas yang meningkat pada tikus, yang menunjukkan ingatan kepunahan yang baik.Selain sel-sel yang memproyeksikan IL, peningkatan aktivitas Fos diamati di area tertentu dari claustrum tikus dan hippocampus ventral dengan resolusi yang baik.Hasil kami menunjukkan bahwa perbedaan ingatan kepunahan dikaitkan dengan pola spesifik aktivitas saraf di dalam dan di luar proyeksi IL.
Pengondisian rasa takut terjadi ketika stimulus netral diasosiasikan dengan stimulus tidak terkondisi yang tidak menyenangkan (UCS), sehingga stimulus yang awalnya netral, sekarang stimulus terkondisi (CS), memunculkan respons rasa takut terkondisi (CR) tanpa adanya UCS.Pembalikan rasa takut terkondisi didorong oleh penurunan CR ke CS karena presentasi CS yang berulang tanpa adanya UCS1.Penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa gangguan stres pasca-trauma (PTSD) dikaitkan dengan ketidakmampuan untuk mengingat kepunahan respons ketakutan yang terkondisi2.Landasan terapi perilaku kognitif untuk pengobatan gangguan stres pascatrauma adalah terapi pemaparan berdasarkan kepunahan respon ketakutan yang dipelajari3,4.Oleh karena itu, studi tentang perbedaan individu dalam ketakutan akan kepunahan hewan pengerat dan mekanisme saraf yang mendasarinya dapat membantu menjelaskan perbedaan respons manusia terhadap trauma dan pengobatan gangguan stres pascatrauma.Meskipun ada kemajuan dalam mengidentifikasi mekanisme saraf yang membedakan memori kepunahan yang berhasil dan yang gagal, masih banyak yang harus ditemukan.
Model hewan pengerat berguna dalam pekerjaan ini karena ada perbedaan individu yang signifikan dalam mengingat kepunahan hewan pengerat7,8,9,10.Pekerjaan sebelumnya yang menyelidiki mekanisme saraf kepunahan rasa takut pada tingkat populasi telah menunjukkan bahwa aktivasi korteks infralibik (IL) diperlukan untuk mengingat kepunahan (referensi 11, 12, 13, tetapi lihat 14), dan beberapa penelitian telah menemukan penurunan dalam aktivitas hewan pengerat di IL menunjukkan ingatan yang buruk tentang kepunahan dibandingkan dengan hewan pengerat, yang sangat ditakuti.Namun, mekanisme di mana ILS terlibat secara berbeda dalam memfasilitasi penghilangan rasa takut pada hewan pengerat dibandingkan dengan yang menunjukkan kepunahan yang lebih lemah tidak jelas.
Salah satu kemungkinannya adalah bahwa perbedaan memori kepunahan rasa takut antar individu adalah hasil dari aktivasi diferensial dari ILS aferen tertentu.Studi anatomi 18 telah menunjukkan bahwa berbagai area kortikal dan subkortikal otak mengirimkan proyeksi padat ke IL, yang pada gilirannya mengirimkan proyeksi eferen ke banyak area otak.Studi tingkat populasi telah menunjukkan bahwa proyeksi IL ke amigdala penting untuk memperoleh kepunahan rasa takut20,21,22 dan masukan IL dari amigdala basolateral (BLA) juga dikaitkan dengan pembelajaran kepunahan.Ada sedikit penelitian tentang keterlibatan sirkuit yang berpusat pada IL dalam ingatan kepunahan, meskipun penelitian terbaru menunjukkan bahwa hippocampus ventral dan dorsal terlibat dalam prediksi IL.Proyeksi eferen IL ke nukleus talamus yang bergabung kembali, tampaknya, juga berpartisipasi dalam ingatan akan kepunahan rasa takut.
Studi-studi sebelumnya ini mulai menggambarkan interaksi sirkuit saraf yang terlibat dalam ingatan kepunahan, tetapi hanya ada sedikit data tentang apakah aktivitas di sirkuit saraf yang berpusat pada IL memengaruhi perbedaan individu dalam ingatan kepunahan.Di sini, kami berusaha untuk menentukan apakah perbedaan memori kepunahan rasa takut antara individu terkait dengan perubahan aktivasi input IL di wilayah otak tertentu.Secara khusus, kami menilai aktivasi sel aferen IL di nukleus paraventrikular thalamus (PVT), klavikula (CLA), BLA, dan ventral hippocampus (vHPC).Daerah otak ini dipilih karena mengirimkan proyeksi padat ke IL dan karena ada alasan untuk menduga bahwa mereka mungkin terlibat dalam ekspresi kepunahan rasa takut 18 .Sebagai contoh, sebuah studi baru-baru ini menunjukkan bahwa PVT, wilayah yang diketahui terlibat dalam perolehan dan reproduksi rasa takut, diperlukan untuk reproduksi kepunahan.Selain itu, penelitian sebelumnya telah menunjukkan peningkatan aktivitas amigdala basal dan vHPC pada tikus yang mengekspresikan memori kepunahan.Terakhir, analisis klaustrum lebih bersifat eksplorasi mengingat tidak ada karya sebelumnya yang menilai perannya dalam kepunahan.Namun, penelitian terbaru menunjukkan bahwa hal itu berperan dalam pengondisian rasa takut secara kontekstual29.
Pelacak retrograde terkonjugasi GFP virus disuntikkan ke dalam IL tikus sebelum pengujian perilaku, dan aktivitas Fos dalam aferen IL diukur selama replay kepunahan, ingatan ketakutan, dan pada tikus yang tidak menjalani pengujian perilaku.Hasil kami menunjukkan bahwa proyeksi dari thalamus paraventrikular posterior ke IL menunjukkan peningkatan aktivitas pada tikus yang berhasil mengingat kepunahan.Selain prediksi IL, aktivitas saraf di area klavikula dan hippocampus ventral tertentu meningkat pada tikus yang mengalami kemunduran dengan baik.Hasil kami menunjukkan bahwa pola aktivitas saraf intrinsik dan ekstrinsik yang diproyeksikan ke IL dikaitkan dengan perbedaan individu dalam memori kepunahan rasa takut.
Lima puluh empat tikus Sprague-Dawley jantan dewasa (300-325 g pada saat kedatangan) yang diperoleh dari Charles River Laboratories (Raleigh, NC) digunakan sebagai subjek.Tikus ditempatkan berpasangan, dengan akses gratis ke makanan dan air, pada siklus terang/gelap 12 jam (lampu menyala pada pukul 7 pagi).Dua kelompok tikus (n = 28 dan n = 26) digunakan untuk percobaan ini.Setelah mengecualikan kematian, kesalahan pembedahan, kurangnya ekspresi GFP di lokasi target, kualitas jaringan yang buruk, dan masalah perilaku (dijelaskan dalam Metode), kelompok penarikan kepunahan termasuk 21 tikus dan kelompok penarikan rasa takut termasuk 7 tikus, kandang rumah.kelompok terdiri dari 7 tikus (35 tikus dimasukkan dalam analisis akhir).Semua prosedur telah disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Institusi Universitas Stony Brook dan sesuai dengan Pedoman ARRIVE (https://arriveguidelines.org) dan Pedoman NIH untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium.
Tikus dirawat dua hari sebelum operasi.Tikus dibius dengan ketamin (87 mg / kg) dan xylazine (10 mg / kg), ditempatkan di alat stereotaxic (Stoelting, Woodale, IL) dan menerima suntikan AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) unilateral ke dalam IL.(keseimbangan suntikan kiri dan kanan).Untuk injeksi, kanula ukuran 22 diturunkan ke tempatnya (AP: + 3.00, ML: ± 0.6, DV: – 5.2).Masukkan kanula dalam 28G (terhubung ke pompa infus melalui pipa PE 20) ke dalam kanula pemandu untuk mengirimkan 0,6 µl virus dengan kecepatan 0,15 µl per menit dan biarkan selama 5 menit setelah infus utuh..Setelah dijahit, tikus disuntik dengan meloxicam (1 mg/kg) dan segera setelah dapat bergerak, tikus dikembalikan ke kandangnya.Tikus disimpan di kandangnya selama sekitar 7 minggu untuk memungkinkan pemulihan virus dan transportasi retrograde.Tiga tikus mati di bawah anestesi, menghasilkan 51 tikus (94%) berhasil pulih dari operasi.
Semua prosedur dilakukan dalam ruang pengkondisian 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) bertempat di kotak isolasi penyerap suara berukuran 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. . Inc.).).Selama sesi pembelajaran kepunahan dan ingatan kepunahan, konteks diubah menjadi berbeda dari konteks bersyarat asli.Kondisi A (penciptaan rasa takut) termasuk pijar 28 volt, bola lampu rumah tangga (Chicago Micro Lighting, UK), sedangkan kondisi B (pelatihan kepunahan, uji daya ingat kepunahan, dan uji daya ingat rasa takut) termasuk lampu LED inframerah (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Cina;U48R).Selain itu, sementara Konteks A memiliki lantai berpalang anti-getaran dengan dinding baja tahan karat dan kaca plexiglass, Konteks B berisi sisipan logam bercat yang ditempatkan di lantai dan dinding.Bentuk Konteks B juga dimodifikasi dengan menempatkan sisipan logam melengkung berukuran 33,5 cm x 21,3 cm ke dalam ruang pendingin standar.Selain itu, dalam konteks A bilik dibersihkan dengan asam asetat 5%, sedangkan dalam konteks B bilik dibersihkan dengan amonium hidroksida 5%.Akhirnya, dalam konteks B, tikus dibawa ke ruang uji dalam ember daripada digulung dalam kandang di atas gerobak.Sesi perilaku direkam dengan kamera atas, dan sinyal video dari setiap kamera dimasukkan ke dalam perangkat lunak (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) yang mengevaluasi perilaku pemudaran berdasarkan perubahan piksel.Parameter dipilih sehingga perilaku fading yang diestimasi oleh komputer sangat cocok dengan perilaku pengamat terlatih yang diestimasi secara manual.Nilai yang menunjukkan persentase waktu pembekuan yang digulung dalam interval 30 detik.
Semua program perilaku dilakukan selama bagian terang dari siklus terang/gelap.Tikus dirawat 5 hari sebelum dimulainya prosedur perilaku dan dipindahkan ke ruang perilaku selama tiga hari terakhir perawatan.Pada hari pertama pengujian perilaku, sekelompok tikus ingatan kepunahan ditempatkan dalam refleks yang dikondisikan oleh rasa takut, kemudian ditempatkan dalam konteks A, diberi periode aklimatisasi tanpa stimulasi selama 6 menit, dan kemudian diberikan kombinasi keduanya 4 kHz, 76 dB, 30 detik. .nada dan penghentian keseluruhan, 1,0 mA, tendangan 1 detik (2 menit ITI).Untuk semua pelatihan perilaku, tikus dikembalikan ke kandang 2 menit setelah pemberian stimulus terakhir.Keesokan harinya, tikus dari kelompok kepunahan-penarikan ditempatkan di ruang konteks B dan melakukan 20 presentasi suara (2 menit ITI) sebagai pelatihan kepunahan setelah periode habituasi 6 menit.Keesokan harinya, tikus pada kelompok reproduksi kepunahan dipaparkan pada 4 nada dalam konteks B setelah masa aklimatisasi selama 6 menit sebagai uji kepunahan.Tikus dalam kelompok memori kepunahan diberi perfusi 60 menit setelah sesi perilaku.Sekelompok tikus kontrol yang membangkitkan ingatan ketakutan menjadi sasaran prosedur yang sama pada hari pertama respons yang dikondisikan oleh rasa takut dalam konteks A. Empat puluh delapan jam kemudian, tikus ditempatkan di ruang konteks B dan mengalami 4 presentasi audio (2- menit ITI) sebagai tes ingatan.ketakutan setelah periode aklimatisasi 6 menit.Tikus diberi perfusi 60 menit setelah sesi perilaku.Sekelompok tikus kontrol rumah tangga tetap berada di kandang rumah mereka selama percobaan dan diperfusi pada hari yang sama dengan tikus percobaan.Masing-masing dari kedua kelompok tikus tersebut dibagi menjadi dua seri, dan jumlah hewan pada masing-masing kelompok diseimbangkan antar seri.Satu tikus dalam kelompok ingatan rasa takut dikeluarkan dari analisis karena tidak menunjukkan tanda-tanda pengondisian rasa takut (membeku kurang dari 15% dari waktu selama tes ingatan rasa takut).Lihat Gambar 2A untuk diagram garis waktu perilaku.
Tikus overdosis dengan larutan Fatal Plus (100 mg / kg), kemudian diperfusi dengan PBS 10% dingin diikuti dengan formalin buffer 10%.Otak dikeluarkan dan disimpan dalam larutan sukrosa 30% dalam formalin pada suhu 4°C selama kurang lebih 1 minggu.Kemudian otak dibekukan dan dipotong menjadi cryostat setebal 40 µm.Bagian disimpan secara berurutan dalam 10% PBS pada suhu 4°C.Kemudian, imunofluoresensi dilakukan pada bagian yang mengambang bebas yang berisi wilayah otak yang diinginkan.Bagian dicuci 3 kali dalam 10% PBS masing-masing selama 5 menit.Bagian-bagian tersebut kemudian diinkubasi dalam larutan penyekat serum kambing normal 5% selama 2 jam pada suhu kamar, dan kemudian dicuci tiga kali lagi masing-masing selama 5 menit dalam PBS 10%.Potongan kemudian diinkubasi semalaman pada suhu 4°C dalam antibodi primer (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) yang diencerkan dalam 1% BSA dalam 10% PBS.Hari berikutnya, bagian dicuci dalam 10% PBS selama 30 menit pada suhu 4°C, kemudian 3 kali selama 5 menit dalam 10% PBS dan diinkubasi dengan antibodi sekunder (Alexa Fluor 594 goat anti-rabbit, red conjugate, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) pada suhu kamar selama 2 jam.Setelah 3 pencucian tambahan dalam 10% PBS selama 5 menit, bagian-bagian ditempatkan pada slide kaca dan disegel dengan Fluoromount-G (Invitrogen).Lihat gambar representatif dari immunostaining pada Gambar 3G.
Mikroskop neon menggunakan kamera digital Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) dan mesin ringan (Lumencor, Beaverton, OR) yang terhubung ke mikroskop Zeiss digunakan untuk memperoleh gambar dari setiap wilayah otak yang diminati, termasuk bagian yang berisi IL tanpa imunofluoresensi.dilakukan untuk mengkonfirmasi penempatan yang benar dari tempat injeksi.Gambar yang digunakan untuk penghitungan sel diperoleh pada perbesaran 20x.Untuk setiap bagian jaringan, ambil satu gambar dengan filter yang memungkinkan visualisasi GFP dan satu gambar dengan filter yang memungkinkan visualisasi konjugat merah Alexa Fluor dalam antibodi sekunder, dan perangkat lunak pencitraan (Infinity Analyze, versi 3) digunakan untuk gambar hamparan.Dapatkan semua gambar dari semua area otak menggunakan pengaturan waktu pemaparan dan penguatan yang sama.Enam tikus dikeluarkan dari analisis karena penularan utama virus terjadi di luar IL (hit rate 88%).Delapan tikus lagi dikeluarkan karena, meskipun virus menyerang IL, mereka tidak menunjukkan ekspresi GFP yang cukup di semua wilayah otak target yang diminati.Selain itu, satu tikus dikeluarkan karena kualitas jaringan yang buruk.
Sesuaikan kecerahan dan kontras untuk mengurangi kebisingan latar belakang pada gambar J (NIH) menggunakan prosedur yang sama untuk setiap gambar.Jumlah sel untuk total sel berlabel retrograde, total sel berlabel Fos, dan total sel berlabel ganda dilakukan secara manual oleh pelaku eksperimen, yang tidak mengidentifikasi hewan, menggunakan plug-in sitometer Image J.Jumlah sel dinormalisasi menjadi sel/mm2.Untuk menganalisis ekspresi Fos dalam sel yang memproyeksikan IL, jumlah sel berlabel ganda dinormalisasi menjadi jumlah total sel berlabel retrograde.Untuk analisis mBLA, mvHPC dan pvHPC, jumlah sel dari beberapa gambar 20x dijumlahkan dan dinormalisasi menjadi sel/mm2.Untuk analisis bagian otak lainnya, gambar 20x atau sebagian dari gambar 20x dianalisis dan dinormalisasi menjadi sel/mm2.Analisis vHPC mencakup wilayah CA1, CA2, dan subdominan vHPC.Gambar 1 menunjukkan daerah otak yang dianalisis dengan gambar yang menggambarkan batas anterior-posterior pesawat.
Singkatan dan lokasi daerah otak yang diminati.Penjelasan singkatan dan lokasi daerah otak diberikan dalam naskah.Peta otak domain publik diambil dari Swanson (2004) Peta Otak: Struktur Otak Tikus, Edisi ke-3, dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), tersedia untuk diunduh di https://larrywswanson.com.
Persentase waktu pembekuan dirata-rata selama periode pemutaran nada 30 detik, tidak termasuk interval menengah.Tingkat ingatan kepunahan dihitung dengan menyatakan persentase waktu pudar selama ingatan kepunahan sebagai persentase pudar selama 4 percobaan pelatihan kepunahan pertama (memudar selama empat nada ingatan kepunahan/fade selama empat nada pelatihan kepunahan pertama*100).Skor rendah menunjukkan ingatan pudar yang baik, dan skor tinggi menunjukkan ingatan pudar yang buruk.Tikus diurutkan berdasarkan skor ingatan kepunahan, dengan tikus di sepertiga teratas dari skor ingatan kepunahan diklasifikasikan sebagai "tikus kepunahan buruk" dan tikus dalam dua pertiga terakhir dari skor ingatan kepunahan diklasifikasikan sebagai "baik".Memori tikus memudar.
Uji nonparametrik digunakan karena data seringkali melanggar asumsi tentang distribusi normal dan/atau homogenitas varians.Korelasi peringkat Spearman digunakan untuk menentukan apakah ada hubungan yang signifikan antara skor ingatan kepunahan dan penanda Fos dan penanda ganda di wilayah otak yang diminati pada semua tikus yang dikenai uji ingatan kepunahan.Mann-Whitney U-test digunakan untuk menentukan apakah ada perbedaan antara dua kelompok independen.Uji Kruskal-Wallis digunakan untuk menentukan apakah 2 kelompok atau lebih berbeda satu sama lain, dan uji perbandingan berganda Dunn digunakan ketika statistik Kruskal-Wallis signifikan.Fading selama pembelajaran kepunahan dinilai menggunakan analisis varian ukuran berulang dengan kelompok sebagai faktor antar-subjek dan tes sebagai faktor intra-subjek. Hasil dianggap signifikan bila p <0,05 untuk semua uji statistik. Hasil dianggap signifikan bila p <0,05 untuk semua uji statistik. Результаты считались значимыми при p < 0,05 для статистических тестов. Hasil dianggap signifikan pada p <0,05 untuk semua uji statistik.当所有统检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。当所有统检验的p < 0.05 时，结果被认为是显着的。 Результаты считались значимыми при p < 0,05 для статистических тестов. Hasil dianggap signifikan pada p <0,05 untuk semua uji statistik.
Gambar 2 menunjukkan garis waktu percobaan (Gambar 2A) dan distribusi frekuensi semua tikus yang mengalami kepunahan (Gambar 2B). Tikus dalam kelompok kepunahan yang baik dan buruk berbeda secara signifikan dalam skor ingatan kepunahan yang dihitung ini (U = 0, p <0, 001) (Gbr. 2C). Tikus dalam kelompok kepunahan yang baik dan buruk berbeda secara signifikan dalam skor ingatan kepunahan yang dihitung ini (U = 0, p <0, 001) (Gbr. 2C). Кысы в ​​г г с с хорим и плохим уашением значительно рч: р р р р р р р р р р р р р р р р00 зн р р р р р р р) (рн р р р р р р р00 зн рн рн рн рн рн рн р р р р р), Tikus dalam kelompok kepunahan yang baik dan buruk berbeda secara signifikan dalam tingkat ingatan kepunahan yang dihitung ini (U = 0, p <0, 001) (Gambar 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异（U = 0，p <0.001）（图2C）（图2C）（图2C） U = 0，p <0,001）（图2C， П покателях припоминаниret уашения кы к р у у у у у у у у у у у у в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в в Dalam tingkat ingatan kepunahan yang dihitung ini, tikus dalam kelompok kepunahan yang baik dan buruk berbeda secara signifikan (U = 0, p <0,001) (Gambar 2C).Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam waktu pembekuan antara kelompok dengan kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan mengingat rasa takut selama periode dasar sesi refleks yang dikondisikan rasa takut (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Gambar 2D).Selain itu, selama presentasi nada pertama refleks terkondisi rasa takut, tidak ada perbedaan yang signifikan dalam waktu pembekuan antara kelompok dengan kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk dan ingatan ketakutan (X2(2) = 1,107, p = 0,575), seperti serta selama ketakutan selama nada kedua.Selama sesi pengkondisian, terdapat perbedaan waktu pembekuan yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, dan recall ketakutan (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (Gambar 2D).Juga tidak ada perbedaan yang signifikan dalam waktu pudar antara kelompok kepunahan yang baik dan buruk selama periode pelatihan kepunahan dasar (U = 45,00, p = 0,799) (Gambar 2D). Selanjutnya, ada efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) pada waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama sesi pelatihan kepunahan (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan terjadi (Gbr. 2D ). Selanjutnya, ada efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) pada waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama sesi pelatihan kepunahan (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan terjadi (Gbr. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 тонов на блок) на время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило ( рис.2D). Kemudian ada efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) pada waktu yang dibutuhkan untuk membekukan selama pelatihan kepunahan (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan sedang berlangsung (Gambar .2D). ).接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 （f （2.884 ，54.80） = 8.331 ， p <0,001） ， 表明 发生 了 消退 （（图 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， 。接下来 ， 在 消退 训练 期间 ， 试块 （每 块 5 音） 对 冻结 时间 有 显着 的 主 效应 （f （2.884 ，54.80） = 8.331 ， p <0,001） ， 表明 发生 了 消退 （（图 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， 。 Затем, во время обучения угашению, пробные блоки (5 тонов на блок) оказали значительное основное влияние на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение угашению происходило (рис .2D). Kemudian, selama pembelajaran kepunahan, blok percobaan (5 nada per blok) memiliki efek utama yang signifikan pada waktu pudar (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan sedang berlangsung (Gbr. .2D) .Namun, kelompok kepunahan (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) tidak berpengaruh signifikan terhadap waktu pudar selama periode pelatihan kepunahan, dan tidak ada interaksi antara blok percobaan dan kelompok kepunahan (F(4 , 19)) .76) = 1,890, p = 0,121) (Gbr. 2D). Selama sesi pengujian, ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan mengingat rasa takut dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) sehingga kelompok mengingat rasa takut membeku secara signifikan lebih dari kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), tetapi bukan kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Gbr. 2D). Selama sesi pengujian, ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan mengingat rasa takut dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) sehingga kelompok mengingat rasa takut membeku secara signifikan lebih dari kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), tetapi bukan kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Gbr. 2D).Selama sesi pengujian, ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan ingatan ketakutan dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2(2) = 8,569, p = 0,014), sehingga kelompok ingatan ketakutan membeku secara signifikan.больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не в группе плохого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). lebih besar dari pada kelompok kepunahan yang baik (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,017) tetapi tidak pada kelompok kepunahan buruk (perbedaan peringkat rata-rata = −3,714, p > 0,999) (Gambar 2D).在 测试 ， ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 和 恐惧 回忆组 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， 因此 回忆组 冻结 冻结 显着 超过 的 灭绝 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）。在 测试 ， ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （（x2 (2) = 8.569 ， p = 0.014） ， 恐惧 回忆组 显着 良好 良好 的 组 组 组 组 组 ， ， ， 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组（平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）。 В течение периода тестирования наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угашением, группой с плохим угашением и группой с припоминанием страха с точки зрения времени замирания на исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), но не группа с плохим вымиранием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Selama periode pengujian, ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kelompok kepunahan yang buruk, dan kelompok fear recall dalam hal waktu pembekuan pada awal (X2(2) = 8,569, p = 0,014), sehingga recall ketakutan kelompok membeku secara signifikan lebih sering daripada kelompok dengan kepunahan yang baik (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,017) tetapi bukan kelompok dengan kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = -3,714, p > 0,999) (Gambar 2D).Kelompok kepunahan yang baik, kelompok kepunahan yang buruk, dan kelompok fear recall juga memiliki waktu pudar yang berbeda secara signifikan selama presentasi nada sesi tes (X2(2) = 14,93, p = 0,001), sehingga kelompok kepunahan yang baik memiliki waktu yang lebih sedikit secara signifikan. waktu.waktu pembekuan dibandingkan pada kelompok kepunahan lemah (perbedaan peringkat rata-rata = 9,286, p = 0,044) dan kelompok memori ketakutan (perbedaan peringkat rata-rata = 13,86, p = 0,001) (Gbr. 2D).
Perbedaan individu dalam mengingat kepunahan.(A) Garis besar prosedur bedah dan perilaku.(B) Distribusi frekuensi menunjukkan perbedaan individu dalam skor memori yang hilang.( C ) Bukti bahwa kelompok yang dirancang berdasarkan skor ingatan kepunahan yang dihitung mewakili dua fenotipe yang berbeda.(D) Persentase rata-rata waktu tikus membeku untuk kepunahan yang buruk, kepunahan yang baik, dan mengingat rasa takut dalam 30 detik sel dari sesi refleks rasa takut yang dikondisikan, dalam nada 20, 30 detik, runtuh menjadi 5 blok selama sesi pembelajaran kepunahan (4 nada ) .masing-masing), dan dalam empat nada dalam sesi kenangan memudar dan kenangan ketakutan.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001。 *p < 0,05，**p < 0,01，***p < 0,001，****p < 0,0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001.
Indikator retrograde disuntikkan ke dalam IL (Gbr. 3A) dan jumlah sel GFP + sepanjang sumbu anterior-posterior dari wilayah yang diminati ditentukan (Gbr. 3B-F).Ada perbedaan yang signifikan dalam jumlah sel GFP+ antara PVT anterior, tengah dan posterior (X2(2) = 8.200, p = 0.017), sehingga mPVT menunjukkan sel GFP+ yang lebih signifikan daripada aPVT (mean rank) Diff.= 18,37, p = 0,035) dan pPVT (perbedaan peringkat rata-rata = 17,71, p = 0,045) (Gbr. 3C).Meskipun beberapa hewan tidak mendeteksi sel GFP+ di pCLA dan karena itu tidak dapat memetakan aktivitas di wilayah ini, tidak ada perbedaan yang signifikan antara CLA anterior, tengah, dan posterior (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Jumlah sel GFP+ (Gambar 3D).Kemudian, karena beberapa sel GFP+ ditemukan di aBLA atau avHPC pada beberapa tikus, hanya bagian tengah dan belakang area ini yang dianalisis.BLA tengah dan posterior (U=393, p=0,009) berbeda secara signifikan dalam jumlah sel GFP+, jadi pBLA menunjukkan lebih banyak proyeksi IL daripada mBLA (Gambar 3E).Demikian pula, ada perbedaan yang signifikan antara vHPCs tengah dan posterior, sehingga pvHPCs menunjukkan lebih banyak proyeksi IL daripada mvHPCs (U = 403,5, p = 0,014) (Gambar 3F).Gambar 3G adalah contoh gambar yang menunjukkan Fos, aavRG-GFP, dan sel berlabel ganda.
Kuantifikasi aferen IL di seluruh wilayah otak yang diinginkan.( A ) Representasi skematis dari distribusi aavRG-CAG-GFP di seluruh IL tikus.( B ) Gambar representatif dari penanda retrograde di berbagai lokasi anteroposterior di wilayah otak yang diminati.Kuantifikasi pelabelan retrograde sepanjang sumbu anteroposterior (C) thalamus paraventrikular, (D) klavikula, (E) tonsil basolateral, dan (F) hippocampus ventral.(G) Gambar representatif yang menunjukkan pelabelan aavRG retrograde, pelabelan Fos, dan pelabelan aavRG dan Fos ganda di aPVT.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata. * p <0,05, ** p <0,01. * p <0,05, ** p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. * p <0,05, ** p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01。 *p < 0,05，**p <0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. * p <0,05, ** p <0,01.Bilah skala 100 µm.Peta otak domain publik di panel A direproduksi dari Swanson (2004) Peta Otak: Struktur Otak Tikus, Edisi ke-3, dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) tersedia untuk diunduh di https://larrywswanson.com.
Aktivitas Fos khusus proyeksi global dan IL dianalisis dalam aPVT, mPVT, dan pPVT pada semua tikus.Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan ketakutan, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di aPVT (X2 (3) = 3,888, p = 0,274) (Gambar 4A), juga tidak ada korelasi yang signifikan antara Fos dalam aPVT antara ekspresi dan penarikan kepunahan (rs = 0,092, p = 0,691) (Gambar 4B) atau antara ekspresi Fos dalam aferen IL aPVT dan penarikan kepunahan (rs = 0,143, p = 0,537) (Gambar 4D).Namun, pada aferen aPVT IL, ekspresi Fos berbeda secara signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut, dan kelompok sel asal (X2(3) = 15,05, p = 0,002), sehingga kelompok mengingat rasa takut menunjukkan kepunahan yang relatif baik.regresi (perbedaan peringkat rata-rata = 11,54, p = 0,003), regresi yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,034), dan sel rumah (perbedaan peringkat rata-rata = 12,79, p = 0,005) kelompok (Gbr. 4C).Selanjutnya, tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan yang takut, dan kelompok sel asal untuk ekspresi Fos di mPVT (X2 (3) = 2.272, p = 0.518) (Gbr. 4E) dan untuk ekspresi Fos di mPVT..Korelasi signifikan dengan recall kepunahan (rs = 0,168 p = 0,468) (Gambar 4F).Meskipun ada perbedaan yang signifikan antara kelompok sel yang baik, buruk, mengingat rasa takut, dan sel asal dalam ekspresi Fos dalam sel mPVT aferen IL (X2(3) = 9,252, p = 0,026), perbandingan post hoc tidak mengungkapkan satu atau dua.Perbedaan signifikan antar kelompok (Gambar 4G).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel mPVT aferen IL dan ingatan kepunahan (rs = 0,174, p = 0,450) (Gambar 4H). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), sehingga kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi bukan kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) atau kelompok mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan (Gbr. 4I). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), sehingga kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi bukan kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) atau kelompok mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan (Gbr. 4I). Далее, наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что группа с хорошим угашением (средний ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), но не в группе плохого угашения (средняя ранговая разница = 12,86, p = 0,113) или группы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис.4I). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos pada pPVT (X2(3)=13.89, p=0.003), sehingga kelompok kepunahan yang baik (mean rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi tidak pada kelompok kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 12.86, p = 0.113) atau kelompok memori ketakutan (perbedaan peringkat rata-rata = 2.571, p > 0.999), menunjukkan ekspresi Fos yang lebih jelas daripada di kelompok sel asal (Gambar 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13.89 ， p = 0,003） 使得 消组 （（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（（rata -rata peringkat DIFFF.= 14.96, p = 0.010)，但不是较差的消退(Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999)，比家庭笄）。）。Kedua, terdapat perbedaan ekspresi Fos yang signifikan pada pPVT antara kelompok sel baik, buruk, ingat takut, dan home cell (X2(3) = 13,89, p = 0,003), menjadikan kelompok asupan baik (mean rank difference = 14,96)., p = 0,010), но не хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) или группе отзыва страха (средняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), tetapi tidak lebih buruk dalam kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,86, p = 0,113) atau kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 2,571, p > 0,999) daripada kelompok sel asal (Gambar 4I)..Namun, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi pPVT Fos dan recall kepunahan (rs = 0,051, p = 0,825) (Gambar 4J).Akhirnya, ada perbedaan yang signifikan dalam ekspresi Fos di aferen pPVT IL antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, kenangan ketakutan, dan di sel rumah (X2(3) = 12,34 p = 0,006), ekspresi Fos yang sangat baik di IL- adalah lebih buruk daripada di kelompok kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,54, p = 0,014) dan di sel rumah (perbedaan peringkat rata-rata = 12,89, p = 0,049) (Gbr. 4K) dan secara signifikan berkorelasi dengan aferen IL di dalam pPVT Antara aktivasi dan pencabutan kepunahan, ingatan kepunahan yang lebih baik dikaitkan dengan aktivasi yang lebih besar dari aferen IL ini (rs = -0,438, p = 0,047) (Gambar 4L).
Aktivitas Fos meningkat pada aferen IL dari posterior paraventrikular thalamus (PVT) pada tikus, yang menunjukkan regresi yang baik.( A ) Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dalam ekspresi Fos di aPVT.( B ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di aPVT.(C) Kelompok mengingat rasa takut menunjukkan peningkatan ekspresi Fos pada aferen IL dibandingkan dengan semua kelompok lainnya.( D ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan penarikan kepunahan pada aPVT.( E ) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di mPVT.( F ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan memori kepunahan di mPVT.( G ) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen di mPVT tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( H ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan penarikan kepunahan pada mPVT.(I) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak ada kelompok lain, yang menunjukkan peningkatan aktivitas Fos di pPVT dibandingkan dengan kelompok kandang rumahan.( J ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan penarikan kepunahan di pPVT.( K ) Kelompok kepunahan yang baik menunjukkan peningkatan ekspresi Fos dalam sel aferen IL dibandingkan dengan kelompok kepunahan lemah dan kelompok sel rumah.( L ) Ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan ingatan kepunahan, sehingga ingatan kepunahan yang baik dikaitkan dengan ekspresi Fos yang lebih besar di aferen IL.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata. * p <0,05, ** p <0,01. * p <0,05, ** p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. * p <0,05, ** p <0,01. *p < 0,05，**p <0,01。 *p < 0,05，**p <0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. * p <0,05, ** p <0,01.
Aktivitas Fos spesifik proyeksi global dan IL di aCLA dan mCLA tikus kemudian dianalisis pada semua kelompok. Ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan takut, dan kandang kandang dalam ekspresi Fos di aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) sehingga kelompok ingatan ketakutan (Mean Rank Diff. = 14.50, p = 0.049), tetapi baik kelompok miskin (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) maupun yang baik (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan ( Gambar 5A). Ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan takut, dan kandang kandang dalam ekspresi Fos di aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) sehingga kelompok ingatan ketakutan (Mean Rank Diff. = 14.50, p = 0.049), tetapi baik kelompok miskin (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) maupun yang baik (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan ( Gambar 5A). Между группами с хорошим угашением, плохим угашением, припоминанием страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так что группа припоминания страха (среднее ранговое различие = 14,50, p = 0,049), но ни плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя ранговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали большей экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( Рис .5A). Ada perbedaan yang signifikan pada ekspresi aCLA Fos antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, mengingat ketakutan dan sel asal (X2(3) = 8,455, p = 0,036), sehingga kelompok mengingat ketakutan (mean rank difference = 14,50, p = 0,049), tetapi baik yang miskin (perbedaan peringkat rata-rata = 10.21, p = 0.373) maupun kelompok kepunahan yang baik (perbedaan peringkat rata-rata = 4.607, p> 0.999) menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok sel asal (Gbr. .5A) . acla 中 fos 表达 的 良好 消退 、 消退差 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 (rata -rata peringkat berbeda = 14.50 ， p = p = 0.049） ， 但 无论是 差 （平均 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 还是 良好 灭绝 （秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 ， 都 显示 比 家庭 家庭 更 多 多 的 表达 ， ， 出 比 比 家庭 笼组 更 多 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8.455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (rata -rata Peringkat diff. = 14.50 ， p = p = p = p = p = 14. 0.049） ， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10.21 ， p = 0.373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4.607 ， p> 0.999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, отзывом страха и домашней клеткой по экспрессии Fos в aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), поэтому группа отзыва страха (среднее ранговое различие = 14,50) , p = 0,049), но группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) и с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut dan kelompok sel rumah dalam ekspresi aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036), jadi kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 14,50), p = 0,049 ), tetapi kelompok dengan kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 10,21, p = 0,373) dan kepunahan yang baik (perbedaan peringkat rata-rata = 4,607, p > 0,999) menunjukkan ekspresi Fos yang lebih tinggi daripada kelompok sel asal (Gbr. 5A). .Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam (rs = 0,036, p = 0,876) (Gambar 5B) atau ekspresi Fos dalam sel aferen IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) dan penarikan kepunahan (Gambar 5B)..5D), juga tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos di aferen aCLA IL (X2(3) = 6.722, p = 0.081) (Gambar 5C)..). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) sehingga kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), tetapi baik kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) maupun kelompok mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) tidak menunjukkan ekspresi Fos yang lebih signifikan dalam mCLA relatif terhadap kelompok kandang rumahan (Gbr. 5E). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) sehingga kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), tetapi baik kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) maupun kelompok mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) tidak menunjukkan ekspresi Fos yang lebih signifikan dalam mCLA relatif terhadap kelompok kandang rumahan (Gbr. 5E). Затем наблюдалась значительная разница между группами с хорошим угашением, плохим угашением, воспоминаниями о страхе и домашней клеткой в ​​​​экспрессии Fos в mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так что группа с хорошим угашением (средняя разница рангов . = 12,93, p = 0,038), но ни группы плохого угашения (средняя ранговая разница = 5,143, p > 0,999), ни группы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos di mCLA. Kemudian ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, kenangan ketakutan dan kelompok sel rumah pada ekspresi mCLA Fos (X2(3) = 10.12, p = 0.018), sehingga kelompok kepunahan yang baik (mean difference rank = 12.93, p = 0,038), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 5,143, p> 0,999) maupun kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 14,00, p = 0,063) menunjukkan ekspresi Fos yang lebih besar secara signifikan dalam mCLA.dibandingkan dengan kelompok kandang kandang (Gambar 5E).接下来 ， 在 McLa 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 （3） = 10.12 ， p = 0.018） ， 良好 （（（（（， （（（ Perbedaan Peringkat Rata-Rata .= 12.93, p = 0.038) ， 但 在 McLa 中 ， 弱消退 （平均 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 恐惧 回忆组 （平均 秩差 = 14.00 ， p = 0.063） 均 未 显示 出 多 多 的 的 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ，相对于家庭笼组（图5E）。 = 12.93, p = 0.038) ， 在 在 在 中 ， ， 弱消退 平均 平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 ， p> 0.999） 和 回忆组 （平均 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 秩差 ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， ， fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далее, в экспрессии Fos в mCLA наблюдалась значительная разница между группой с хорошим угасанием, группой с плохим угасанием, группой с отзывом о страхе и группой с домашней клеткой (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, группа хорошего угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), но в mCLA ни слабое угасание (средняя разница рангов = 5,143, p > 0,999), ни группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисунок 5E). Selanjutnya, ada perbedaan yang signifikan dalam ekspresi Fos di mCLA antara kelompok pemusnahan baik, kelompok pemusnahan buruk, kelompok umpan balik rasa takut, dan kelompok sel asal (X2(3) = 10,12, p = 0,018), dengan demikian, sel baik kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,93, p = 0,038), tetapi dalam mCLA tidak ada kepunahan lemah (perbedaan peringkat rata-rata = 5,143, p > 0,999) atau kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 14,00, p = 0,999) = 0,063) menunjukkan hasil yang lebih baik Ekspresi Multi Fos dibandingkan dengan kelompok sel asal (Gambar 5E).Namun, ekspresi Fos global dalam mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (Gbr. 5F) atau dalam sel mCLA IL aferen (rs = -0,121, p = 0,602) dan penarikan kepunahan (Gbr. 5H), tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut, dan sel asal untuk ekspresi Fos dalam sel aferen IL mCLA (X2 (3) = 4.923, p = 0.178) (Gambar 5G).
Aktivitas Fos meningkat pada mid-claustrum pada tikus dengan memori kepunahan yang baik.(A) Kelompok mengingat rasa takut, tetapi tidak pada kelompok lain, menunjukkan peningkatan aktivitas Fos dibandingkan dengan kelompok sel asal di aCLA.( B ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aCLA dan penarikan kepunahan.( C ) Ekspresi Fos dalam sel aCLA aferen IL tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( D ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan penarikan kepunahan di aCLA.(E) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak pada kelompok lain, menunjukkan peningkatan aktivitas Fos di mCLA dibandingkan dengan kelompok sel asal.( F ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan penarikan kepunahan di mCLA.( G ) Ekspresi Fos dalam sel aferen IL mCLA tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( H ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan penarikan kepunahan di mCLA.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata. * p <0,05. * p <0,05. *p < 0,05. * p <0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *p < 0,05. * p <0,05.
Kemudian, aktivitas Fos khusus proyeksi global dan IL dalam mBLA dan pBLA dianalisis pada semua kelompok tikus.Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan ketakutan, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos di mBLA (X2(3)=0.944, p=0.815) (Gambar 6A).Juga tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dengan regresi yang baik, regresi yang buruk, mengingat rasa takut, dan ekspresi Fos sel rumah dalam sel aferen IL mBLA (X2 (3) = 0,518, p = 0,915) (Gambar 6C).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Gambar 6B) dan ekspresi Fos dalam sel aferen IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Gambar 6D) dan recall kepunahan.Juga tidak ada perbedaan yang signifikan dalam kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, memori ketakutan, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos pada pBLA (X2 (3) = 4,246, p = 0,236) (Gbr. 6E), dan juga tidak ada perbedaan yang signifikan di pBLA Baik.kepunahan, kepunahan yang buruk, mengingat rasa takut, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos dalam sel aferen IL (X2 (3) = 1,954, p = 0,582) (Gambar 6G).Akhirnya, ekspresi Fos global dalam pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Gbr. 6F) dan ekspresi Fos dalam sel aferen pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) dan penarikan kepunahan (Gbr. 6H).
Perbedaan individu dalam reproduksi kepunahan tidak dipetakan pada perbedaan ekspresi Fos di amigdala basolateral.( A ) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di mBLA.( B ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di mBLA.( C ) Ekspresi Fos dalam sel aferen IL mBLA tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( D ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel aferen IL dan penarikan kepunahan dalam mBLA.(E) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di pBLA.( F ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan penarikan kepunahan di pBLA.( G ) Ekspresi Fos dalam sel pBLA IL aferen tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( H ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel aferen IL dan penarikan kepunahan pada pBLA.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata.
Terakhir, aktivitas Fos khusus proyeksi global dan IL dianalisis dalam mvHPC dan pvHPC pada semua tikus. Ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) sehingga kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 13,29 , p = 0,031), tetapi tidak ada kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) atau mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) kelompok menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan (Gbr. 1). 7A). Ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, mengingat ketakutan, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) sehingga kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 13,29 , p = 0,031), tetapi tidak ada kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) atau mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) kelompok menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kandang rumahan (Gbr. 1). 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в группах с плохим угасанием (средняя ранговая разница = 6,857, p > 0,999), ни в группе с отзывом страха (средняя ранговая разница = 8,000, p = 0,864) экспрессия Fos была выше, чем в группе с домашней клеткой (рис.7А). Ada perbedaan yang signifikan dalam ekspresi mvHPC Fos antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, mengingat rasa takut, dan sel rumah (X2(3) = 8,056, p = 0,045), kepunahan sangat baik (perbedaan peringkat rata-rata = 13,29), p = 0,031), tetapi baik dalam kelompok kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 6,857, p> 0,999) maupun dalam kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 8,000, p = 0,864) adalah ekspresi Fos yang lebih tinggi daripada kelompok asal.sel (Gbr. 7A). mvhpc 中 fos 表达 的 良好 消退 、 不良 消退 、 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 (3) = 8.056, p = 0,045） ， 良好 消退 （平均 秩差 = 13.29 ， ， p = 0,031 ） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还是 恐惧 回忆 （平均 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组都 显示 出 比 家庭 笼组 更 的 的 fos 表达 （图））。。。。 家庭 家庭 笼组 笼组 多 的。。。。。。。。。。。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8.056, p = 0,045） ， 良好 （平均 秩差 秩差 = 13.29） p = 0,031） ， 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6.857 ， p> 0.999） 还 是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8.000 ， p = 0.864） 组 都 出 家庭 笼组 的 的 fos 表达 图 。。。。 ））））））））））））））））））））））））））））））））））） Имелась значительная разница между группами «хорошо», «плохо», «припоминание страха» и «домашняя клетка» для экспрессии Fos в mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) и, следовательно, хорошая регрессия (средняя разница рангов = 13,29), p = 0,031), но группы со слабым угасанием (средняя разница рангов = 6,857, p > 0,999) и воспоминания о страхе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Ada perbedaan yang signifikan antara kelompok sel yang baik, buruk, mengingat rasa takut, dan rumah untuk ekspresi Fos di mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) dan oleh karena itu regresi yang baik (perbedaan peringkat rata-rata = 13,29), p = 0,031), tetapi kelompok dengan kepunahan lemah (perbedaan peringkat rata-rata = 6,857, p > 0,999) dan kenangan ketakutan (perbedaan peringkat rata-rata = 8,000, p = 0,864) menunjukkan ekspresi Fos yang lebih tinggi daripada kelompok di kandang rumah (Gbr. 2).7A).Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Gambar 7C).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Gambar 7B) dan ekspresi Fos dalam sel IL aferen mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (Gambar 7D) .dan laporan tentang hilangnya.Selanjutnya, tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan ketakutan, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos pada pvHPC (X2(3) = 3.623, p = 0.353) (Gambar 7E), dan tidak ada perbedaan yang signifikan.perbedaan dalam regresi yang baik dari ekspresi Fos dalam sel IL aferen pvHPC, regresi yang buruk, memori ketakutan, dan kelompok sel rumah (X2(3)=3.871, p=0.276) (Gbr. 7G).Akhirnya, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global pvHPC (rs = −0.127, p = 0.584) (Gambar 7F) dan ekspresi Fos dalam sel pvHPC aferen-IL (rs = 0.176, p = 0.447) dan penarikan kepunahan (Gambar 7F ).7H).
Ekspresi Fos meningkat di ventral hippocampus tikus, menunjukkan kepunahan memori yang baik.( A ) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak pada kelompok lain, menunjukkan peningkatan ekspresi Fos di mvHPC dibandingkan dengan kelompok sel asal.( B ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di mvPHC.( C ) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen mvHPC tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( D ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan penarikan kepunahan pada mvHPC.( E ) Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dalam ekspresi Fos di pvHPC.( F ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan penarikan kepunahan di pvHPC.( G ) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen pVHPC tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.( H ) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan penarikan kepunahan pada pvHPC.Bilah kesalahan mewakili standar deviasi rata-rata. * p <0,05. * p <0,05. *p < 0,05. * p <0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *p < 0,05. * p <0,05.Analisis utama kami untuk semua wilayah menunjukkan perbandingan pada tiga tingkat di sepanjang sumbu anteroposterior, meskipun kami juga menganalisis setiap wilayah yang runtuh di sepanjang sumbu anteroposterior.Hasil analisis tersebut disajikan pada tabel 1.
Di sini kami menguji apakah perbedaan individu dalam ingatan kepunahan akan tercermin dalam pola aktivitas aferen yang berbeda di korteks limbik bawah.Untuk tujuan ini, kami menilai aktivitas Fos dalam proyeksi IL dari thalamus paraventrikular, claustrum, tonsil basolateral, dan hippocampus ventral setelah replay kepunahan.Dalam sel yang memproyeksikan IL, kami menemukan aktivitas yang lebih tinggi di wilayah posterior PVT pada tikus yang menunjukkan ingatan kepunahan yang baik dibandingkan dengan tikus dengan kepunahan yang buruk.Tidak ada perbedaan aferen IL dari nukleus klavikula, hippocampus ventral, atau tonsil basolateral.Selain sel-sel yang memproyeksikan IL, peningkatan aktivitas saraf diamati di area tertentu dari claustrum tikus dan hippocampus ventral dengan resolusi yang baik.Hasil kami menunjukkan bahwa memori kepunahan yang berhasil diatur oleh proyeksi PVT spesifik ke sel penargetan IL dan non-IL di claustrum dan ventral hippocampus.
Kami menemukan bahwa prediksi PVT IL aktif pada tikus yang menunjukkan ingatan kepunahan yang baik, yang konsisten dengan penelitian terbaru yang menunjukkan bahwa PVT diperlukan untuk ingatan kepunahan.Studi ini tidak menggunakan manipulasi khusus subkawasan, tetapi menunjukkan bahwa proyeksi PVT pada amigdala sentral lateral dan proyeksi IL pada PVT diperlukan untuk mereproduksi kepunahan.Hasil kami menunjukkan bahwa, selain rantai IL-PVT-CeL, entri pasca-PVT ke IL mungkin juga diperlukan untuk quench recall.Jadi, ternyata koneksi IL eferen dan aferen terlibat dalam reproduksi kepunahan.Langkah penting selanjutnya adalah menentukan apa yang menyebabkan pPVT memberi sinyal reproduksi kepunahan pada tingkat sirkuit saraf.Selain hubungan dengan IL, studi pelacakan saluran sebelumnya31,32 telah menunjukkan bahwa pPVT menerima input dari abu-abu periaqueductal ventral (vPAG), yang dikaitkan dengan pembelajaran kepunahan33,34,35,36.Meskipun peran vPAG dalam penarikan kepunahan belum ditetapkan, prediksi pPVT oleh vPAG merupakan kandidat yang menarik karena kepadatannya dan keterlibatan kedua wilayah dalam menghasilkan bukti kepunahan ketakutan sebelumnya.
Aspek penting lainnya dari hasil PVT kami adalah bahwa mereka terspesialisasi di sepanjang sumbu anterior-posteriornya.Yang mengejutkan, aktivitas saraf dari proyeksi PVT di IL berkorelasi dengan keadaan perilaku yang berlawanan, sehingga aktivitas proyeksi pra-PVT di IL dikaitkan dengan ingatan rasa takut, sedangkan proyeksi pPVT aktif setelah kepunahan ingatan yang berhasil (yaitu, ketakutan).Heterogenitas fungsional dalam PVT ini tidak mengherankan mengingat pekerjaan sebelumnya [dibahas dalam 37].Contoh mencolok dari distribusi fungsional di PVT baru-baru ini muncul dalam sebuah penelitian yang mengkarakterisasi sifat-sifat tipe sel tertentu di PVT.Studi ini menunjukkan bahwa sel dopamin pengekspres DRD2 sebagian besar diekspresikan dalam pPVT, menginervasi korteks tungkai depan, dan merespons rangsangan yang tidak menyenangkan.Populasi sel kedua sebagian besar diekspresikan dalam aPVT dan menandai transisi ke keadaan gairah fisiologis rendah dan menginervasi korteks tungkai bawah.Hasil kami hampir tidak cocok dengan pola ini, karena sel aPVT yang memproyeksikan IL aktif selama mengingat rasa takut, sementara proyeksi pPVT aktif dan hewan menunjukkan tingkat ketakutan yang rendah.Setidaknya ada dua kemungkinan penjelasan untuk perbedaan yang tampak.Pertama, jenis sel yang teridentifikasi tidak terletak secara eksklusif di satu lokasi anterior-posterior TVV.Dengan demikian, sel pPVT yang memproyeksikan IL aktif pada tikus dengan memori kepunahan yang baik mungkin termasuk dalam kelas sel yang lebih mungkin terdeteksi dalam aPVT dan menandakan transisi ke keadaan gairah rendah.Hal yang sama mungkin berlaku untuk sel-sel yang memproyeksikan IL dalam aPVT yang diaktifkan setelah memori ketakutan.Kedua, studi penelusuran sebelumnya telah mengidentifikasi keberadaan pPVT yang memproyeksikan IL3, meskipun beberapa tampaknya berasal dari sel yang mengandung DRD2, tipe sel lain dapat memproyeksikan ke IL dan menjadi aktif setelah reproduksi quenching berhasil.
Meskipun tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi perbedaan antara tikus yang menunjukkan fenotipe kepunahan yang berbeda, percobaan ini juga mengungkap data baru terkait mekanisme memori ketakutan.Menariknya, kami menemukan peningkatan aktivitas Fos pada CLA anterior pada tikus dengan memori ketakutan.
Klavikula diposisikan sebagai pusat komunikasi kortikal dan terlibat dalam proses mulai dari integrasi sensorik hingga perhatian dan tidur40,41,42,43.Ada bukti terbatas tentang bagaimana claustrum terlibat dalam pengondisian rasa takut atau ekspresi ketakutan, namun penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa ekspresi ketakutan kontekstual terlibat dalam aktivitas Fos di claustrum.Baru-baru ini dilaporkan bahwa penghambatan proyeksi atresia ke korteks entorhinal selama pengondisian rasa takut kontekstual merusak pembentukan memori jangka panjang, meskipun kebutuhan mereka akan ekspresi rasa takut belum diuji.Dalam studi yang sama, peningkatan aktivasi Fos diamati ketika hewan terpapar ke lingkungan baru dibandingkan dengan tikus yang terpapar ke lingkungan yang akrab.Dengan mengingat hal ini, aktivasi CLA yang kami laporkan di sini mungkin disebabkan oleh paparan kamera baru selama pengujian, bukan karena takut akan penarikan itu sendiri.Untuk lebih akurat mencirikan fungsi kunci dalam ketakutan dan pemrosesan situasional, penelitian selanjutnya harus menggunakan manipulasi kunci yang ditargetkan.
Meskipun pekerjaan sebelumnya telah menunjukkan bahwa PVT dikaitkan dengan ekspresi memori rasa takut, 45,46,47 kami tidak mengamati perubahan total ekspresi Fos pada tikus ketika mereka mengingat rasa takut 48 jam setelah pengkondisian.Perbedaan ini dapat dijelaskan oleh beberapa faktor, termasuk pengujian kerja sebelumnya ketakutan akan isyarat diskrit dalam konteks yang sama di mana pengkondisian terjadi, sedangkan dalam percobaan kami, pengujian dilakukan di ruangan baru.Selain itu, kami menidurkan hewan kami 60 menit setelah pengujian, sedangkan pekerjaan sebelumnya menggunakan titik waktu 90 menit.Terakhir, pada penelitian sebelumnya, pengujian dilakukan di ruangan di mana hewan dapat merespon dengan nafsu makan, sedangkan pada penelitian kami, tikus diuji tanpa respon nafsu makan.Meskipun hal ini memungkinkan untuk beberapa tingkat penghambatan terkondisi, ada bukti bahwa membiarkan hewan menghambat tekanan untuk mendapatkan makanan sambil menguji apakah mereka takut akan isyarat menciptakan konflik motivasi (yaitu, ketakutan versus penghargaan), yang merupakan faktor penstimulasi utama.partisipasi PVT48, 49. .
Amigdala basolateral diketahui terlibat dalam perolehan kepunahan rasa takut50,51 dan terdapat bukti bahwa proyeksi BLA ke IL juga terlibat dalam proses ini23.Namun, tidak jelas apakah BLA dan koneksinya terlibat dalam kepunahan kembali.Studi pencitraan23,28 telah menunjukkan peningkatan aktivitas BLA pada hewan yang mengingat ingatan yang memudar.Sementara pekerjaan kami sebelumnya menunjukkan tidak ada perbedaan dalam aktivasi BLA antara tikus kepunahan yang baik dan buruk, hasil kami di sini menunjukkan bahwa ingatan kepunahan umumnya tidak mempengaruhi BLA atau aktivasi dalam memprediksi BLA IL.Konsisten dengan temuan kami, meskipun studi manipulasi sirkuit menunjukkan bahwa input IL ke BLA penting untuk pembelajaran kepunahan, mereka tidak diperlukan untuk mengingat kepunahan.Namun, peran BLA tidak dapat diabaikan sepenuhnya karena bukti terbaru menunjukkan bahwa jenis sel tertentu dalam BLA diperlukan untuk mereproduksi kepunahan.
Khususnya, mengingat rasa takut tidak menghasilkan aktivasi Fos di BLA, karena studi lesi, obat, dan pencitraan sebelumnya telah melibatkan area ini dalam ekspresi ketakutan dan / atau rekonsolidasi ketakutan setelah pengambilan54,55,56,57.Data yang disajikan di sini menggabungkan subnukleus basal dan lateral amigdala, dan data sebelumnya menunjukkan bahwa ekspresi ketakutan mendorong aktivitas Fos di sisi dorsal nukleus lateral.Kami menganalisis data dasar dan lateral secara terpisah, tetapi tidak ada perbedaan pada kedua kasus tersebut (data tidak ditampilkan) dan kedua area runtuh dalam data yang kami sajikan di sini.Kami tidak menganalisis subregional amigdala lateral, jadi perubahan spesifik di area ini mungkin tertutupi.Kemungkinan lain dari tidak adanya perubahan aktivitas Fos di BLA adalah karena pengaturan waktu memori ketakutan dibandingkan dengan pengkondisian.Beberapa pekerjaan sebelumnya telah menunjukkan bahwa kontribusi BLA terhadap ekspresi ketakutan menurun seiring waktu setelah pengkondisian, sehingga ekspresi bergantung pada BLA pada 24 jam pasca pengkondisian tetapi independen pada 7 hari (ref. 45 tetapi lihat 58).terjadi 48 jam setelah pelatihan, membuat kurangnya perubahan dalam aktivitas Fos pada titik waktu ini kemungkinan besar mencerminkan perubahan yang bergantung pada waktu dalam partisipasi BLA dalam ekspresi ketakutan.
Akhirnya, kami menemukan bukti bahwa kepunahan memori yang sukses dikaitkan dengan hippocampus ventral.Ini adalah karakteristik vHPC "perantara" karena pola yang sama tidak terlihat di wilayah posterior.Konsisten dengan pekerjaan sebelumnya, kami tidak menemukan perubahan dalam aktivasi Fos di IL vHPC aferen.Ada bukti substansial bahwa vHPC28,60,61 diperlukan untuk aktualisasi rasa takut ketika CS terjadi di luar konteks di mana fading terjadi, dan ini bergantung setidaknya sebagian pada masuknya vHPC ke IL13.Berdasarkan hasil sebelumnya ini, kami memperkirakan pemudaran yang buruk dikaitkan dengan peningkatan aktivitas IL yang diprediksi dari vHPC.Namun, ini tidak terjadi karena tidak ada perbedaan dalam aktivitas Fos pada vHPC berlabel retrograde yang diproyeksikan IL atau sel yang tidak berlabel dalam vHPC.Ini menunjukkan bahwa ketidakmampuan untuk mengingat fading dalam konteks fading dapat memicu mekanisme yang berbeda dari rasa takut akan pembaharuan.
Penting untuk dicatat beberapa batasan desain dan analisis yang melekat dan bagaimana mereka mempengaruhi kesimpulan kami.Pertama, kami membagi hewan menjadi sepertiga atas dan bawah, dan tikus menjadi "baik" dan "buruk" berdasarkan skor ingatan kepunahan.Hal ini dilakukan untuk menghindari skema kelompok yang membagi hewan menjadi kelompok terpisah dari tengah sebaran, atau skema kelompok yang mengecualikan hewan dari tengah sebaran, seperti pemisahan dengan median atau perbandingan sepertiga bagian atas dan bawah tikus. .kami ingin menghindari situasi ini karena pembagian median tidak mencerminkan variabilitas respons manusia terhadap trauma yang kami coba modelkan.Selain itu, sementara membandingkan sepertiga atas dan bawah tikus memungkinkan kita untuk membandingkan kelompok dengan ukuran yang sama, pendekatan ini mengabaikan hewan di pusat distribusi dan tidak secara akurat mencerminkan variabilitas reaksi terhadap cedera.Sementara metode kami mungkin mengalami masalah dengan varians heterogen dan membandingkan kelompok dengan ukuran sampel yang tidak sama, metode ini menangkap apa yang kami coba tiru dengan lebih baik daripada metode alternatif.
Hasil yang disajikan di sini membantu kita lebih memahami bagaimana perbedaan individu dalam ingatan kepunahan tercermin dalam perbedaan aktivitas sirkuit saraf.Temuan kami mungkin relevan dengan gangguan stres pasca-trauma, yang diketahui terkait dengan rasa takut yang berlebihan dan ketidakmampuan untuk menghilangkan respons rasa takut.Kami menunjukkan bahwa perbedaan ingatan kepunahan dikaitkan dengan perbedaan aktivitas saraf intrinsik dan ekstrinsik yang diproyeksikan ke IL.Perbedaan-perbedaan ini didistribusikan ke seluruh wilayah yang berbeda di sepanjang sumbu anteroposterior, yang selanjutnya menyoroti pentingnya menilai fungsi otak di tingkat subregional.Kerugian dari metode saat ini termasuk relevansi penelitian dan fokus pada hewan pengerat jantan.Penelitian di masa depan harus menentukan mekanisme neurobiologis yang mendasari pembelajaran kepunahan pada hewan pengerat betina dan menggunakan metode untuk menarik kesimpulan kausal.
Kumpulan data yang digunakan dan/atau dianalisis dalam penelitian ini tersedia dari masing-masing penulis berdasarkan permintaan yang masuk akal.
Pavlov IP Conditioning: studi tentang aktivitas fisiologis korteks serebral.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Menerapkan prinsip-prinsip pembelajaran untuk pengobatan reaksi pasca-trauma. Rothbaum, BO, & Davis, M. Menerapkan prinsip-prinsip pembelajaran untuk pengobatan reaksi pasca-trauma.Rotbaum BO dan Davis M. Menerapkan prinsip-prinsip pembelajaran untuk pengobatan reaksi pasca-trauma.Rotbaum BO dan Davis M. Penerapan prinsip-prinsip pembelajaran dalam pengobatan reaksi pasca-trauma.Install.Universitas New York.ilmu.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Tinjauan terapi pemaparan: standar emas untuk pengobatan PTSD. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Tinjauan terapi pemaparan: standar emas untuk pengobatan PTSD.Rauch SA, Eftekhari A. dan Ruzek DI Ulasan terapi paparan: pengobatan standar emas untuk gangguan stres pasca trauma. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Tinjauan terapi pemaparan: Standar emas untuk pengobatan PTSD.Rauch, SA, Eftekhari, A. dan Ruzek, DI Ulasan terapi paparan: pengobatan standar emas untuk gangguan stres pascatrauma.J. Rehabilitasi.pengembangan reservoir 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapi pemaparan panjang: masa lalu, sekarang dan masa depan.Represi Kecemasan 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Tuan Millard dkk.Penyebab hilang ingatan yang eksistensial dan didapat pada gangguan stres pasca-trauma: temuan dari studi kembar.J. Psikiater.tangki penyimpanan.42(7), 515-520 (2008).
Tuan Millard dkk.Dasar neurobiologis dari ketidakmampuan untuk mengingat ingatan yang memudar pada gangguan stres pasca-trauma.biologi.Psikologi.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: Mengisolasi reaktivitas ketakutan dan fenotip pemulihan ketakutan. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: Mengisolasi reaktivitas ketakutan dan fenotip pemulihan ketakutan.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. dan LeDoux, JE Perbedaan individu dalam rasa takut: membedakan fenotipe reaktivitas rasa takut dan pemulihan rasa takut. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: isolasi respons ketakutan dan tabel pemulihan ketakutan.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. dan LeDoux, JE Perbedaan individu dalam rasa takut: isolasi respons rasa takut dan fenotipe pemulihan rasa takut.J. Trauma.tekanan 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Respon kejut akustik pada tikus memprediksi variasi antar individu dalam kepunahan rasa takut. Russo, AS & Parsons, RG Respon kejut akustik pada tikus memprediksi variasi antar individu dalam kepunahan rasa takut.Russo, AS dan Parsons, RG Respon kejut akustik pada tikus memprediksi perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut. Russo, AS & Parsons, RG bekerja sama dengan perusahaan-perusahaan di Amerika Serikat. Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS dan Parsons, RG Respon kejut akustik pada tikus memprediksi perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut.Neurobiologi.belajar.Penyimpanan.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Variabilitas individu dalam mengingat kepunahan rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan-mitogen di korteks infralimbik. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Variabilitas individu dalam mengingat kepunahan rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan-mitogen di korteks infralimbik.Russo, AS, Lee, J. dan Parsons, RG Variabilitas individu dalam kepunahan mengingat rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan-mitogen di korteks infralimbik. Russo, AS, Lee, J. & Parson, RG Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Ingatan akan rasa takut memudar terkait dengan perbedaan individu dalam fosforifikasi perifer.Russo, AS, Lee, J. dan Parsons, RG Perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut selama ingatan dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan-mitogen di korteks ekstremitas bawah.Psikofarmakologi 236(7), 2039–2048 (2019).