Terima kasih telah mengunjungi Nature.com.Versi browser yang Anda gunakan memiliki dukungan CSS yang terbatas.Untuk pengalaman terbaik, kami menyarankan Anda menggunakan browser yang diperbarui (atau menonaktifkan Mode Kompatibilitas di Internet Explorer).Sementara itu, untuk memastikan dukungan berkelanjutan, kami akan merender situs tanpa gaya dan JavaScript.
Gangguan stres pascatrauma (PTSD) ditandai dengan penurunan kemampuan menetralisir respons rasa takut terhadap isyarat yang terkait dengan trauma.Penelitian pada manusia dan hewan menunjukkan perbedaan dalam keterlibatan area tertentu di korteks frontal sebagai mediator utama yang menentukan keberhasilan penindasan rasa takut, namun interaksi sirkuit saraf yang menentukan perbedaan keterlibatan area ini masih belum jelas.Untuk lebih memahami bagaimana perbedaan individu dalam ingatan kepunahan tercermin dalam perbedaan aktivitas sirkuit saraf, kami memberi label proyeksi dari korteks sublimbik tikus (IL) dengan pelacak retrograde dan membandingkan proyeksi saraf di dalam dan di luar neuron proyeksi IL.Kami menganalisis data ini, mengelompokkannya menurut tingkat pelestarian memori memudar pada tikus.Kami menemukan bahwa pada sel yang memproyeksikan IL, neuron di parathalamus posterior menunjukkan peningkatan aktivitas pada tikus, yang menunjukkan daya ingat kepunahan yang baik.Selain sel yang memproyeksikan IL, peningkatan aktivitas Fos diamati di area tertentu pada klaustrum tikus dan hipokampus ventral dengan resolusi yang baik.Hasil kami menunjukkan bahwa perbedaan dalam ingatan kepunahan dikaitkan dengan pola spesifik aktivitas saraf di dalam dan di luar proyeksi IL.
Pengkondisian rasa takut terjadi ketika stimulus netral dikaitkan dengan stimulus yang tidak terkondisikan (UCS), sehingga stimulus yang awalnya netral, sekarang stimulus terkondisi (CS), menimbulkan respons rasa takut yang terkondisi (CR) tanpa adanya UCS.Pembalikan rasa takut yang terkondisi didorong oleh penurunan CR menjadi CS karena presentasi CS yang berulang tanpa adanya UCS1.Penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa gangguan stres pascatrauma (PTSD) dikaitkan dengan ketidakmampuan mengingat hilangnya respons rasa takut yang terkondisi2.Landasan terapi perilaku kognitif untuk pengobatan gangguan stres pasca-trauma adalah terapi pemaparan berdasarkan hilangnya respons rasa takut yang dipelajari3,4.Oleh karena itu, studi tentang perbedaan individu dalam ketakutan akan kepunahan hewan pengerat dan mekanisme saraf yang mendasarinya dapat membantu menjelaskan perbedaan respons manusia terhadap trauma dan pengobatan gangguan stres pasca-trauma.Meskipun ada kemajuan dalam mengidentifikasi mekanisme saraf yang membedakan ingatan kepunahan yang berhasil dan yang tidak berhasil, masih banyak yang harus ditemukan.
Model hewan pengerat berguna dalam penelitian ini karena terdapat perbedaan individu yang signifikan dalam ingatan akan kepunahan hewan pengerat7,8,9,10.Penelitian sebelumnya yang menyelidiki mekanisme saraf dari kepunahan rasa takut pada tingkat populasi telah menunjukkan bahwa aktivasi korteks infralibik (IL) diperlukan untuk mengingat kembali kepunahan (referensi 11, 12, 13, tapi lihat 14), dan beberapa penelitian telah menemukan penurunan dalam aktivitas hewan pengerat di IL menunjukkan ingatan yang buruk tentang kepunahan dibandingkan dengan hewan pengerat, yang sangat ditakuti.Namun, mekanisme keterlibatan IL dalam memfasilitasi penghapusan rasa takut pada hewan pengerat dibandingkan dengan hewan pengerat yang menunjukkan tingkat kepunahan yang lebih lemah masih belum jelas.
Salah satu kemungkinannya adalah perbedaan memori kepunahan rasa takut antar individu adalah hasil dari aktivasi diferensial ILS aferen spesifik.Studi anatomi18 menunjukkan bahwa berbagai area kortikal dan subkortikal otak mengirimkan proyeksi padat ke IL, yang pada gilirannya mengirimkan proyeksi eferen ke banyak area otak.Studi tingkat populasi telah menunjukkan bahwa proyeksi IL ke amigdala penting untuk memperoleh rasa takut terhadap kepunahan20,21,22 dan masukan IL dari amigdala basolateral (BLA) juga dikaitkan dengan pembelajaran kepunahan.Penelitian tentang keterlibatan sirkuit yang berpusat pada IL dalam ingatan kepunahan masih sedikit, meskipun penelitian terbaru menunjukkan bahwa hipokampus ventral dan dorsal terlibat dalam prediksi IL.Proyeksi eferen IL ke inti rekombinasi talamus, tampaknya, juga berpartisipasi dalam memori kepunahan rasa takut.
Studi-studi sebelumnya ini mulai memberikan gambaran tentang interaksi sirkuit saraf yang terlibat dalam ingatan kepunahan, namun hanya ada sedikit data mengenai apakah aktivitas dalam sirkuit saraf yang berpusat pada IL mempengaruhi perbedaan individu dalam ingatan kepunahan.Di sini, kami berusaha untuk menentukan apakah perbedaan memori kepunahan rasa takut antar individu dikaitkan dengan perubahan aktivasi input IL di wilayah otak tertentu.Secara khusus, kami menilai aktivasi sel aferen IL dalam nukleus paraventrikular talamus (PVT), klavikula (CLA), BLA, dan ventral hippocampus (vHPC).Wilayah otak ini dipilih karena wilayah tersebut mengirimkan proyeksi padat ke IL dan karena ada alasan untuk mencurigai bahwa wilayah tersebut mungkin terlibat dalam ekspresi rasa takut terhadap kepunahan 18 .Misalnya, penelitian baru-baru ini menunjukkan bahwa PVT, wilayah yang diketahui terlibat dalam perolehan dan reproduksi rasa takut, diperlukan untuk reproduksi kepunahan.Selain itu, penelitian sebelumnya menunjukkan peningkatan aktivitas basal amigdala dan vHPC pada tikus yang mengekspresikan memori kepunahan.Terakhir, analisis klaustrum lebih bersifat eksploratif karena belum ada penelitian sebelumnya yang mengkaji perannya dalam kepunahan.Namun, penelitian terbaru menunjukkan bahwa hal ini berperan dalam pengondisian rasa takut secara kontekstual29.
Pelacak retrograde terkonjugasi GFP virus disuntikkan ke dalam IL tikus sebelum pengujian perilaku, dan aktivitas Fos dalam aferen IL diukur selama pemutaran ulang kepunahan, ingatan akan rasa takut, dan pada tikus yang tidak menjalani pengujian perilaku.Hasil kami menunjukkan bahwa proyeksi dari thalamus paraventrikular posterior ke IL menunjukkan peningkatan aktivitas pada tikus yang berhasil mengingat kepunahan.Selain prediksi IL, aktivitas saraf di area tertentu pada klavikula dan ventral hipokampus meningkat pada tikus yang mengalami kemunduran dengan baik.Hasil kami menunjukkan bahwa pola aktivitas saraf intrinsik dan ekstrinsik yang diproyeksikan ke IL dikaitkan dengan perbedaan individu dalam memori kepunahan rasa takut.
Lima puluh empat tikus Sprague-Dawley jantan dewasa (300-325 g pada saat kedatangan) yang diperoleh dari Laboratorium Charles River (Raleigh, NC) digunakan sebagai subjek.Tikus ditempatkan berpasangan, dengan akses bebas terhadap makanan dan air, dalam siklus terang/gelap 12 jam (lampu menyala pada jam 7 pagi).Dua kelompok tikus (n = 28 dan n = 26) digunakan untuk percobaan ini.Setelah kematian, kesalahan pembedahan, kurangnya ekspresi GFP di lokasi target, kualitas jaringan yang buruk, dan masalah perilaku (dijelaskan dalam Metode) disingkirkan (dijelaskan dalam Metode), kelompok recall kepunahan mencakup 21 tikus dan kelompok recall ketakutan mencakup 7 tikus, kandang rumah.kelompok ini terdiri dari 7 tikus (35 tikus dilibatkan dalam analisis akhir).Semua prosedur telah disetujui oleh Komite Perawatan dan Penggunaan Hewan Institusional Universitas Stony Brook dan sesuai dengan Pedoman ARRIVE (https://arriveguidelines.org) dan Pedoman NIH untuk Perawatan dan Penggunaan Hewan Laboratorium.
Tikus dirawat dua hari sebelum operasi.Tikus dibius dengan ketamin (87 mg/kg) dan xylazine (10 mg/kg), ditempatkan dalam alat stereotaxic (Stoelting, Woodale, IL) dan menerima suntikan AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) unilateral ke dalam IL.(menyeimbangkan suntikan kiri dan kanan).Untuk injeksi, kanula ukuran 22 diturunkan ke tempatnya (AP: + 3.00, ML: ± 0.6, DV: – 5.2).Masukkan kanula bagian dalam 28G (terhubung ke pompa infus melalui pipa PE 20) ke dalam kanula pemandu untuk mengalirkan 0,6 µl virus dengan kecepatan 0,15 µl per menit dan biarkan di tempatnya selama 5 menit setelah infus utuh..Setelah dilakukan penjahitan, tikus disuntik meloxicam (1 mg/kg) dan segera setelah mampu bergerak dikembalikan ke kandangnya.Tikus-tikus tersebut disimpan di kandangnya selama sekitar 7 minggu untuk memungkinkan pemulihan virus dan transportasi retrograde.Tiga tikus mati di bawah anestesi, sehingga 51 tikus (94%) berhasil pulih dari operasi.
Semua prosedur dilakukan di ruang pengkondisian berukuran 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) yang ditempatkan di kotak isolasi penyerap suara berukuran 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. . Inc.).).Pada sesi pembelajaran kepunahan dan pemanggilan kembali kepunahan, konteksnya diubah menjadi berbeda dengan konteks kondisional aslinya.Kondisi A (penghasil rasa takut) mencakup lampu pijar 28 volt, bola lampu rumah tangga (Chicago Micro Lighting, UK), sedangkan kondisi B (pelatihan kepunahan, uji ingatan kepunahan, dan uji ingatan rasa takut) mencakup lampu LED inframerah (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Tiongkok;U48R).Selain itu, meskipun Konteks A memiliki lantai berpalang anti-getaran dengan dinding baja tahan karat dan kaca plexiglass, Konteks B berisi sisipan logam dicat yang ditempatkan di lantai dan dinding.Bentuk Context B juga dimodifikasi dengan menempatkan sisipan logam melengkung berukuran 33,5 cm x 21,3 cm ke dalam ruang pengkondisian standar.Selain itu, pada konteks A ruangan diseka dengan asam asetat 5%, sedangkan pada konteks B ruangan diseka dengan amonium hidroksida 5%.Terakhir, dalam konteks B, tikus dibawa ke ruang pengujian dengan ember, bukan digulingkan dalam kandang dan menggunakan gerobak.Sesi perilaku direkam dengan kamera atas, dan sinyal video dari masing-masing kamera dimasukkan ke dalam perangkat lunak (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) yang mengevaluasi perilaku pemudaran berdasarkan perubahan piksel.Parameter tersebut dipilih sehingga perilaku fading yang diperkirakan oleh komputer mendekati perilaku pengamat terlatih yang diperkirakan secara manual.Nilai yang menunjukkan persentase waktu pembekuan dalam interval 30 detik.
Semua program perilaku dilakukan selama bagian terang dari siklus terang/gelap.Tikus dirawat 5 hari sebelum dimulainya prosedur perilaku dan dipindahkan ke ruang perilaku selama tiga hari terakhir pengobatan.Pada hari pertama pengujian perilaku, sekelompok tikus yang mengingat kepunahan ditempatkan dalam refleks terkondisi ketakutan, kemudian ditempatkan dalam konteks A, diberi periode aklimatisasi tanpa stimulasi selama 6 menit, dan kemudian diberikan kedua kombinasi 4 kHz, 76 dB, 30 detik. .nada dan terminasi keseluruhan, 1,0 mA, kick 1 s (2 menit ITI).Untuk semua pelatihan perilaku, tikus dikembalikan ke kandang 2 menit setelah pemberian stimulus terakhir.Keesokan harinya, tikus dari kelompok yang mengingat kepunahan ditempatkan di ruang konteks B dan melakukan 20 presentasi suara (2 menit ITI) sebagai pelatihan kepunahan setelah periode pembiasaan 6 menit.Keesokan harinya, tikus kelompok reproduksi punah dipaparkan 4 nada pada konteks B setelah masa aklimatisasi selama 6 menit sebagai uji kepunahan.Tikus dalam kelompok memori kepunahan diberi perfusi 60 menit setelah sesi perilaku.Sekelompok tikus kontrol yang membangkitkan ingatan rasa takut dikenakan prosedur yang sama pada hari pertama respons yang dikondisikan rasa takut dalam konteks A. Empat puluh delapan jam kemudian, tikus ditempatkan di ruang konteks B dan dikenakan 4 presentasi audio (2- menit ITI) sebagai tes mengingat.ketakutan setelah periode aklimatisasi 6 menit.Tikus diberi perfusi 60 menit setelah sesi perilaku.Sekelompok tikus kontrol domestik tetap berada di kandangnya selama percobaan dan diberi perfusi pada hari yang sama dengan tikus percobaan.Masing-masing dari dua kelompok tikus dibagi menjadi dua seri, dan jumlah hewan dalam setiap kelompok seimbang antar seri.Satu tikus dalam kelompok ingatan rasa takut dikeluarkan dari analisis karena tidak menunjukkan tanda-tanda pengondisian rasa takut (berhenti kurang dari 15% selama tes ingatan rasa takut).Lihat Gambar 2A untuk diagram garis waktu perilaku.
Tikus overdosis dengan larutan Fatal Plus (100 mg/kg), kemudian diberi perfusi dengan PBS 10% dingin diikuti dengan formalin buffer 10%.Otak dikeluarkan dan disimpan dalam larutan sukrosa 30% dalam formalin pada suhu 4°C selama sekitar 1 minggu.Kemudian otak dibekukan dan dipotong menjadi cryostat setebal 40 µm.Bagian disimpan secara berurutan dalam PBS 10% pada suhu 4°C.Kemudian, imunofluoresensi dilakukan pada bagian mengambang bebas yang berisi wilayah otak yang diinginkan.Bagian dicuci 3 kali dalam PBS 10% masing-masing selama 5 menit.Bagian tersebut kemudian diinkubasi dalam larutan pemblokiran 5% serum kambing normal selama 2 jam pada suhu kamar, dan kemudian dicuci tiga kali lagi selama 5 menit masing-masing dalam PBS 10%.Bagian-bagian tersebut kemudian diinkubasi semalaman pada suhu 4°C dalam antibodi primer (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) yang diencerkan dalam 1% BSA dalam 10% PBS.Keesokan harinya, bagian dicuci dalam 10% PBS selama 30 menit pada suhu 4°C, kemudian 3 kali selama 5 menit dalam 10% PBS dan diinkubasi dengan antibodi sekunder (Alexa Fluor 594 kambing anti-kelinci, konjugat merah, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) pada suhu kamar selama 2 jam.Setelah 3 kali pencucian tambahan dalam 10% PBS selama 5 menit, bagian ditempatkan pada slide kaca dan ditutup dengan Fluoromount-G (Invitrogen).Lihat gambar representatif dari immunostaining pada Gambar 3G.
Mikroskop fluoresen menggunakan kamera digital Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) dan mesin cahaya (Lumencor, Beaverton, OR) yang terhubung ke mikroskop Zeiss digunakan untuk memperoleh gambar dari setiap wilayah otak yang diinginkan, termasuk bagian yang mengandung IL tanpa imunofluoresensi.dilakukan untuk memastikan penempatan tempat suntikan yang benar.Gambar yang digunakan untuk penghitungan sel diperoleh dengan pembesaran 20x.Untuk setiap bagian jaringan, ambil satu gambar dengan filter yang memungkinkan visualisasi GFP dan satu gambar dengan filter yang memungkinkan visualisasi konjugat merah Alexa Fluor dalam antibodi sekunder, dan perangkat lunak pencitraan (Infinity Analyze, versi 3) digunakan untuk gambar hamparan.Dapatkan semua gambar dari seluruh area otak menggunakan waktu pemaparan yang sama dan dapatkan pengaturan.Enam tikus dikeluarkan dari analisis karena penularan utama virus terjadi di luar IL (88% hit rate).Delapan tikus lagi dikeluarkan dari penelitian karena, meskipun virus menyerang IL, mereka tidak menunjukkan ekspresi GFP yang cukup di semua wilayah otak target yang diteliti.Selain itu, satu tikus dikeluarkan karena kualitas jaringan yang buruk.
Sesuaikan kecerahan dan kontras untuk mengurangi noise latar belakang pada gambar J (NIH) menggunakan prosedur yang sama untuk setiap gambar.Jumlah sel untuk total sel berlabel retrograde, total sel berlabel Fos, dan total sel berlabel ganda dilakukan secara manual oleh peneliti, yang tidak mengidentifikasi hewan, menggunakan plug-in sitometer Image J.Jumlah sel dinormalisasi menjadi sel/mm2.Untuk menganalisis ekspresi Fos dalam sel yang memproyeksikan IL, jumlah sel berlabel ganda dinormalisasi menjadi jumlah total sel berlabel retrograde.Untuk analisis mBLA, mvHPC dan pvHPC, jumlah sel dari beberapa gambar 20x dijumlahkan dan dinormalisasi menjadi sel/mm2.Untuk analisis wilayah otak lainnya, gambar berukuran 20x atau sebagian dari gambar berukuran 20x dianalisis dan dinormalisasi menjadi sel/mm2.Analisis vHPC mencakup CA1, CA2 dan wilayah vHPC subdominan.Gambar 1 menunjukkan wilayah otak yang dianalisis dengan gambar yang menggambarkan batas anterior-posterior bidang.
Singkatan dan lokasi wilayah otak yang diminati.Penjelasan singkatan dan letak daerah otak diberikan dalam naskah.Peta otak domain publik diambil dari Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, Edisi ke-3, dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), tersedia untuk diunduh di https://larrywswanson.com.
Persentase waktu pembekuan dirata-ratakan selama periode pemutaran nada 30 detik, tidak termasuk interval perantara.Tingkat recall kepunahan dihitung dengan menyatakan persentase waktu memudar selama recall kepunahan sebagai persentase fade selama 4 uji coba pelatihan kepunahan pertama (memudar selama empat nada recall kepunahan/memudar selama empat nada pelatihan kepunahan pertama*100).Skor yang rendah menunjukkan memori fade yang baik, dan skor yang tinggi menunjukkan memori fade yang buruk.Tikus diurutkan berdasarkan skor ingatan kepunahan, dengan tikus yang berada di sepertiga teratas skor ingatan kepunahan diklasifikasikan sebagai “tikus kepunahan yang buruk” dan tikus yang berada di dua pertiga terakhir dari skor ingatan kepunahan diklasifikasikan sebagai “baik”.Memori tikus memudar.
Uji nonparametrik digunakan karena data sering kali melanggar asumsi distribusi normal dan/atau homogenitas varians.Korelasi peringkat Spearman digunakan untuk menentukan apakah ada hubungan yang signifikan antara skor ingatan kepunahan dan penanda Fos dan penanda ganda di wilayah otak yang diminati pada semua tikus yang menjalani tes ingatan kepunahan.Uji Mann-Whitney U digunakan untuk mengetahui apakah ada perbedaan antara dua kelompok independen.Uji Kruskal-Wallis digunakan untuk menentukan apakah 2 kelompok atau lebih berbeda satu sama lain, dan uji perbandingan berganda Dunn digunakan jika statistik Kruskal-Wallis signifikan.Memudar selama pembelajaran kepunahan dinilai menggunakan analisis varians pengukuran berulang dengan kelompok sebagai faktor antar mata pelajaran dan tes sebagai faktor intra mata pelajaran. Hasil dianggap signifikan bila p <0,05 untuk semua uji statistik. Hasil dianggap signifikan bila p <0,05 untuk semua uji statistik. Jumlah yang diperlukan untuk p < 0,05 untuk nilai tukar. Hasil dianggap signifikan pada p <0,05 untuk semua uji statistik.当所有统计检验的p < 0,05 时,结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时,结果被认为是显着的。 Jumlah yang diperlukan untuk p < 0,05 untuk nilai tukar. Hasil dianggap signifikan pada p <0,05 untuk semua uji statistik.
Gambar 2 menunjukkan garis waktu percobaan (Gambar 2A) dan distribusi frekuensi semua tikus yang mengalami kepunahan (Gambar 2B). Tikus dalam kelompok kepunahan baik dan miskin berbeda secara signifikan dalam skor ingatan kepunahan yang dihitung (U = 0, p <0,001) (Gbr. 2C). Tikus dalam kelompok kepunahan baik dan miskin berbeda secara signifikan dalam skor ingatan kepunahan yang dihitung (U = 0, p <0,001) (Gbr. 2C). Ada banyak hal yang perlu dilakukan dan manfaat yang dapat diperoleh melalui telepon ям припоминания угашения (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Tikus dalam kelompok kepunahan baik dan miskin berbeda secara signifikan dalam perhitungan tingkat ingatan kepunahan (U=0, p<0,001) (Gambar 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中,良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异（U = 0,p <0.001）（图2C ）。 U = 0,p <0,001）（图2C, Ini adalah pilihan yang tepat untuk membantu Anda dan anak-anak Anda ием значительно различались (U = 0, p <0,001) (рис. 2C). Dalam perhitungan tingkat ingatan kepunahan ini, tikus dalam kelompok kepunahan baik dan miskin berbeda secara signifikan (U = 0, p <0,001) (Gambar 2C).Tidak ada perbedaan yang signifikan dalam waktu pembekuan antara kelompok dengan kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan ingatan akan rasa takut selama periode dasar sesi refleks terkondisi rasa takut (X2(2) = 2.746, p = 0.253) (Gambar 2D).Selain itu, selama presentasi nada pertama refleks terkondisi rasa takut, tidak ada perbedaan waktu pembekuan yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, dan ingatan rasa takut (X2(2) = 1,107, p = 0,575), sebagai serta saat ketakutan pada nada kedua.Selama sesi pengkondisian, terdapat perbedaan waktu pembekuan yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, dan recall rasa takut (X2(2) = 2.214, p = 0.331) (Gambar 2D).Juga tidak terdapat perbedaan signifikan dalam waktu memudar antara kelompok kepunahan yang baik dan yang buruk selama periode pelatihan kepunahan awal (U = 45.00, p = 0.799) (Gambar 2D). Selanjutnya, terdapat efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) terhadap waktu yang dihabiskan untuk pembekuan selama sesi pelatihan kepunahan (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), yang menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan terjadi (Gbr. 2D ). Selanjutnya, terdapat efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) terhadap waktu yang dihabiskan untuk pembekuan selama sesi pelatihan kepunahan (F (2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), yang menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan terjadi (Gbr. 2D ). Затем наблюдался значительный основной эффект пробного блока (5 ton per jam) di время, затрачиваемое на замирание во время тренировки угашения (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), что указывает на то, что обучение у гашению происходило ( misalnya. Kemudian terdapat efek utama yang signifikan dari blok percobaan (5 nada per blok) pada waktu yang dibutuhkan untuk membekukan selama pelatihan pemadaman (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), yang menunjukkan bahwa pembelajaran pemadaman sedang berlangsung (Gambar .2D). ).接下来,在消退训练期间,试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884,54.80）=8.331,p < 0,001）,表明发生了消退学习（图2D） ） 。接下来,在消退训练期间,试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2.884,54.80）=8.331,p < 0,001）,表明发生了消退学习（图2D） ） 。 Tentu saja, Anda harus membayar lebih banyak uang (5 ton per hari) untuk mendapatkan nilai yang lebih tinggi на время замирания (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), yang berarti bahwa ( misalnya .2D). Kemudian, selama pembelajaran kepunahan, blok percobaan (5 nada per blok) memiliki pengaruh utama yang signifikan terhadap waktu pudar (F(2.884, 54.80) = 8.331, p <0.001), menunjukkan bahwa pembelajaran kepunahan sedang berlangsung (Gbr. .2D) .Namun kelompok kepunahan (F(1, 19) = 3.091, p = 0.095) tidak memberikan pengaruh yang signifikan terhadap waktu fade sepanjang periode pelatihan kepunahan, dan tidak terdapat interaksi antara blok percobaan dengan kelompok kepunahan (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (Gbr. 2D). Selama sesi pengujian, terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan kelompok yang mengingat rasa takut dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2 (2) = 8.569, p = 0.014) sehingga kelompok yang mengingat rasa takut membeku secara signifikan lebih dari kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), namun tidak pada kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Gbr. 2D). Selama sesi pengujian, terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan kelompok yang mengingat rasa takut dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2 (2) = 8.569, p = 0.014) sehingga kelompok yang mengingat rasa takut membeku secara signifikan lebih dari kelompok kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 10.57, p = 0.017), namun tidak pada kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = − 3.714, p > 0.999) (Gbr. 2D).Selama sesi pengujian, terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, dan kelompok yang mengingat rasa takut dalam waktu yang dihabiskan untuk membekukan selama periode awal (X2(2) = 8.569, p = 0.014), sehingga kelompok yang mengingat rasa takut membeku secara signifikan.больше, чем в группе хорошего вымирания (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), tidak ada в группе пло хого вымирания (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). lebih besar daripada kelompok kepunahan baik (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,017) tetapi tidak pada kelompok kepunahan buruk (perbedaan peringkat rata-rata = −3,714, p > 0,999) (Gambar 2D).在测试期间,良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间方面存在显着差异（X2 (2) = 8,569,p = 0,014）, 因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57,p = 0,017）,但不是差的灭绝组（平均秩差= – 3,714,p > 0,999）（图2D）。在 测试 期间 , 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异 （ （x2 (2) = 8,569 , p = 0,014） , 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57,p = 0,017）,但不是差绝组（平均秩差= – 3,714,p > 0,999）（图2D）。 Dalam teknik ini, Anda dapat menggunakan metode yang sama untuk membantu Anda yaitu, bantuan dari dokter dan dokter yang membantu Anda dalam menangani penyakit Anda исходном уровне (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), поэтому припоминание страха группа замерзает значительно чаще , чем группа с хорошим вымиранием (средняя разница рангов = 10,57, p = 0,017), tidak ada группа с плохим вымиран ием (средняя разница рангов = -3,714, p> 0,999) (рис. 2D). Selama masa pengujian, terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kelompok kepunahan buruk, dan kelompok ingat ketakutan ditinjau dari waktu pembekuan pada awal (X2(2) = 8.569, p = 0.014), sehingga recall ketakutan kelompok membeku secara signifikan lebih sering dibandingkan kelompok dengan kepunahan baik (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,017) namun tidak pada kelompok dengan kepunahan buruk (perbedaan peringkat rata-rata = -3,714, p > 0,999) (Gambar 2D).Kelompok kepunahan yang baik, kelompok kepunahan yang buruk, dan kelompok yang mengingat rasa takut juga mempunyai waktu pudar yang berbeda secara signifikan selama presentasi nada sesi tes (X2(2) = 14.93, p = 0.001), sehingga kelompok kepunahan yang baik memiliki waktu yang jauh lebih sedikit untuk kelompok kepunahan yang baik. waktu.waktu pembekuan dibandingkan pada kelompok kepunahan lemah (perbedaan peringkat rata-rata = 9,286, p = 0,044) dan kelompok memori ketakutan (perbedaan peringkat rata-rata = 13,86, p = 0,001) (Gbr. 2D).
Perbedaan individu dalam ingatan akan kepunahan.(A) Garis besar prosedur bedah dan perilaku.(B) Distribusi frekuensi menunjukkan perbedaan individu dalam skor memori yang hilang.(C) Bukti bahwa kelompok yang dirancang berdasarkan skor ingatan kepunahan yang dihitung mewakili dua fenotipe yang berbeda.(D) Persentase rata-rata waktu tikus membeku untuk kepunahan yang buruk, kepunahan yang baik, dan mengingat kembali rasa takut dalam sel 30 detik dari sesi refleks rasa takut yang terkondisi, dalam nada 20, 30 detik, dipecah menjadi 5 blok selama sesi pembelajaran kepunahan (4 nada) .masing-masing), dan dalam empat nada dalam sesi kenangan memudar dan kenangan ketakutan.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *p < 0,05,**p < 0,01,***p < 0,001,****p < 0,0001。 *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Indikator retrograde disuntikkan ke dalam IL (Gambar 3A) dan jumlah sel GFP+ di sepanjang sumbu anterior-posterior dari wilayah yang diinginkan ditentukan (Gambar 3B-F).Terdapat perbedaan jumlah sel GFP+ yang signifikan antara PVT anterior, tengah, dan posterior (X2(2) = 8,200, p = 0,017), sehingga mPVT menunjukkan lebih banyak sel GFP+ secara signifikan dibandingkan aPVT (mean rank) Diff.= 18.37, p = 0.035) dan pPVT (rata-rata peringkat Diff. = 17.71, p = 0.045) (Gbr. 3C).Meskipun beberapa hewan tidak mendeteksi sel GFP+ di pCLA dan oleh karena itu tidak dapat memetakan aktivitas di wilayah ini, tidak ada perbedaan yang signifikan antara CLA anterior, tengah, dan posterior (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Jumlah sel GFP+ (Gambar 3D).Kemudian, karena beberapa sel GFP+ ditemukan di aBLA atau avHPC pada beberapa tikus, hanya bagian tengah dan belakang area tersebut yang dianalisis.BLA tengah dan posterior (U=393, p=0,009) berbeda secara signifikan dalam jumlah sel GFP+, sehingga pBLA menunjukkan lebih banyak proyeksi IL dibandingkan mBLA (Gambar 3E).Demikian pula, terdapat perbedaan yang signifikan antara vHPC tengah dan posterior, sehingga pvHPC menunjukkan lebih banyak proyeksi IL dibandingkan mvHPC (U = 403,5, p = 0,014) (Gambar 3F).Gambar 3G adalah gambar contoh yang menunjukkan sel Fos, aavRG-GFP, dan berlabel ganda.
Hitung aferen IL di seluruh wilayah otak yang diinginkan.(A) Representasi skema distribusi aavRG-CAG-GFP di seluruh IL tikus.(B) Gambar representatif dari penanda retrograde di lokasi anteroposterior berbeda di wilayah otak yang diinginkan.Kuantifikasi pelabelan retrograde sepanjang sumbu anteroposterior (C) talamus paraventrikular, (D) klavikula, (E) tonsil basolateral, dan (F) hipokampus ventral.(G) Gambar representatif yang menunjukkan pelabelan aavRG retrograde, pelabelan Fos, dan pelabelan aavRG dan Fos ganda di aPVT.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01。 *p < 0,05,**p < 0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.Bilah skala 100 µm.Peta otak domain publik di panel A direproduksi dari Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, dilisensikan di bawah Lisensi Internasional Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) tersedia untuk diunduh di https://larrywswanson.com.
Aktivitas Fos spesifik proyeksi global dan IL dianalisis dalam aPVT, mPVT dan pPVT pada semua tikus.Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di aPVT (X2(3) = 3.888, p = 0.274) (Gambar 4A), juga tidak ada korelasi yang signifikan antara Fos dalam aPVT antara ekspresi dan recall kepunahan (rs = 0,092, p = 0,691) (Gambar 4B) atau antara ekspresi Fos dalam aferen aPVT IL dan recall kepunahan (rs = 0,143, p = 0,537) (Gambar 4D).Namun, pada aferen aPVT IL, ekspresi Fos berbeda secara signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, ingatan rasa takut, dan kelompok sel rumah (X2(3) = 15,05, p = 0,002), sehingga kelompok ingatan rasa takut menunjukkan kepunahan yang relatif baik.kelompok regresi (perbedaan peringkat rata-rata = 11,54, p = 0,003), regresi buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 10,57, p = 0,034), dan sel rumah (perbedaan peringkat rata-rata = 12,79, p = 0,005) (Gbr. 4C).Lebih lanjut, tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel asal untuk ekspresi Fos di mPVT (X2(3) = 2.272, p = 0.518) (Gambar 4E) dan untuk ekspresi Fos di mPVT..Korelasi signifikan dengan recall kepunahan (rs = 0,168 p = 0,468) (Gambar 4F).Meskipun ada perbedaan yang signifikan antara kelompok sel baik, buruk, ingatan takut, dan sel rumah dalam ekspresi Fos dalam sel mPVT aferen IL (X2(3) = 9,252, p = 0,026), perbandingan post hoc tidak mengungkapkan satu atau dua.Perbedaan yang signifikan antar kelompok (Gambar 4G).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel mPVT aferen IL dan recall kepunahan (rs = 0,174, p = 0,450) (Gambar 4H). Selanjutnya terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, recall rasa takut, dan kandang kandang pada ekspresi Fos pada pPVT (X2(3) = 13.89, p = 0.003), sehingga kelompok kepunahan baik (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi bukan kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) atau kelompok recall rasa takut (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), menampilkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kelompok kandang rumah (Gbr. 4I). Selanjutnya terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, recall rasa takut, dan kandang kandang pada ekspresi Fos pada pPVT (X2(3) = 13.89, p = 0.003), sehingga kelompok kepunahan baik (Mean Rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi bukan kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) atau kelompok recall rasa takut (Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999), menampilkan lebih banyak ekspresi Fos daripada kelompok kelompok kandang rumah (Gbr. 4I). Дале secara, наблюдалась значительная рница между г г пи ур), кой В ээспресс balik Fos В ppvt (x2 (3) = 13,89, p = 0,003), так что г г с хошим уашением (срншимимением (с сойийиш уашением (с сойий уашением (с сойие у г у у гuman г у г bersenda Diff. = 14,96, p = 0,010), tidak ada dalam jumlah yang sama = 12,86, p = 0,113) atau lebih ппы воспоминаний о страхе (средняя ранговая разница = 2,571, p > 0,999), демонстрировалась более выраженная экспрессия Fos, чем в группе группа домашних клеток (рис. 4I). Selanjutnya terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, ingatan rasa takut, dan kelompok sel asal pada ekspresi Fos di pPVT (X2(3)=13.89, p=0.003), sehingga kelompok kepunahan baik (mean rank Diff. = 14.96, p = 0.010), tetapi tidak pada kelompok kepunahan buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 12.86, p = 0.113) atau kelompok memori ketakutan (perbedaan peringkat rata-rata = 2.571, p > 0.999), menunjukkan ekspresi Fos yang lebih jelas dibandingkan pada kelompok sel asal (Gambar 4I).其次 , ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 , p = 0,0 03） 使得 消组 （（berarti Perbedaan Peringkat.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Mean Rank Diff. = 12.86, p = 0.113) 或恐惧回忆组(Mean Rank Diff. = 2.571, p > 0.999)，比家庭笼组（图4I ）。= 14,96, p = 0,010),但不是较差的消退(Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ）。Kedua, terdapat perbedaan yang signifikan dalam ekspresi Fos di pPVT antara kelompok baik, buruk, mengingat rasa takut, dan kelompok sel rumah (X2(3) = 13.89, p = 0.003), sehingga menjadikan kelompok asupan baik (perbedaan peringkat rata-rata = 14.96)., p = 0,010), tidak ada хуже по угашению (средняя разница рангов = 12,86, p = 0,113) atau группе отзыва страха (сре дняя разница рангов = 2,571, p > 0,999), чем в группе домашней клетки (рис. 4I) . , p = 0,010), tetapi tidak lebih buruk pada kelompok kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,86, p = 0,113) atau kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 2,571, p > 0,999) dibandingkan kelompok sel asal (Gambar 4I)..Namun, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi pPVT Fos dan recall kepunahan (rs = 0,051, p = 0,825) (Gambar 4J).Terakhir, terdapat perbedaan ekspresi Fos yang signifikan pada aferen pPVT IL antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, ingatan ketakutan, dan di sel rumah (X2(3) = 12,34 p = 0,006), sehingga ekspresi Fos yang baik pada IL- adalah lebih buruk daripada di kelompok kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,54, p = 0,014) dan di sel rumah (perbedaan peringkat rata-rata = 12,89, p = 0,049) (Gbr. 4K) dan secara signifikan berkorelasi dengan aferen IL di dalam pPVT Antara aktivasi dan pencabutan kepunahan, ingatan kepunahan yang lebih baik dikaitkan dengan aktivasi yang lebih besar dari aferen IL ini (rs = -0,438, p = 0,047) (Gambar 4L).
Aktivitas fos meningkat pada aferen IL dari thalamus paraventrikular posterior (PVT) pada tikus, yang menunjukkan regresi yang baik.(A) Tidak ada perbedaan yang signifikan antar kelompok dalam ekspresi Fos di aPVT.(B) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan recall kepunahan di aPVT.(C) Kelompok mengingat rasa takut menunjukkan peningkatan ekspresi Fos pada aferen IL dibandingkan dengan semua kelompok lainnya.(D) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan recall kepunahan pada aPVT.(E) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di mPVT.(F) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan memori kepunahan di mPVT.(G) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen di mPVT tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(H) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan recall kepunahan pada mPVT.(I) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak ada kelompok lain, yang menunjukkan peningkatan aktivitas Fos di pPVT dibandingkan dengan kelompok kandang.(J) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan recall kepunahan di pPVT.(K) Kelompok kepunahan yang baik menunjukkan peningkatan ekspresi Fos pada sel aferen IL dibandingkan kelompok kepunahan lemah dan kelompok sel asal.(Kiri) Terdapat korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos pada aferen IL dan recall kepunahan, sehingga recall kepunahan yang baik dikaitkan dengan ekspresi Fos yang lebih besar pada aferen IL.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05,**p < 0,01。 *p < 0,05,**p < 0,01。 *р < 0,05, **р < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01.
Aktivitas Fos spesifik proyeksi global dan IL dalam aCLA dan mCLA tikus kemudian dianalisis di semua kelompok. Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok kandang kandang pada ekspresi Fos di aCLA (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) sehingga pada kelompok ingatan rasa takut (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), tetapi baik kelompok miskin (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) maupun kelompok yang punah baik (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos dibandingkan kelompok kandang ( Gambar 5A). Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok kandang kandang pada ekspresi Fos di aCLA (X2 (3) = 8.455, p = 0.036) sehingga pada kelompok ingatan rasa takut (Mean Rank Diff. = 14,50, p = 0,049), tetapi baik kelompok miskin (Mean Rank Diff. = 10.21, p = 0.373) maupun kelompok yang punah baik (Mean Rank Diff. = 4.607, p > 0.999), menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos dibandingkan kelompok kandang ( Gambar 5A). ‘ зница В экспрессиonya Fos В acla (x2 (3) = 8.455, p = 0,036), так чч г п п00, пз гз ганз гз га50з гз гз гз гз гз гарз гз гз гар. = 0,049), bukan плохая (средняя ранговая разница = 10,21, p = 0,373), ни группа с хорошим вымиранием (средняя р анговая разница = 4,607, p > 0,999) не демонстрировали экспрессии Fos, чем группа в домашней клетке ( misalnya .5А). Terdapat perbedaan ekspresi aCLA Fos yang signifikan antara kelompok good Extinction, Poor Extinction, Fear Recall dan Home Cells (X2(3) = 8.455, p = 0.036), sehingga pada kelompok Fear Recall (mean rank differential = 14.50, p = 0,049), namun kelompok miskin (perbedaan peringkat rata-rata = 10,21, p = 0,373) maupun kelompok kepunahan baik (perbedaan peringkat rata-rata = 4,607, p > 0,999) tidak menunjukkan ekspresi Fos lebih banyak dibandingkan kelompok sel asal (Gbr. .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8.455, p = 0.036),因此恐惧回忆组(Perbedaan Peringkat Rata-rata = 14,50,p = 0,049）,但无论是差（平均秩差= 10,21,p = 0,373）还是良好灭绝（平均秩差= 4,607,p > 0,999）组,都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) 。 Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x 2 (3) = 8,455, p = 0,036) , 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (rata-rata Perbedaan Peringkat = 14,50 , P = P = P = P = P = 14. 0,049） , 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 , p = 0,373） 良好 灭绝 （平均秩差 秩差 = 4,607 , p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Anda dapat melakukan pekerjaan dengan baik, membantu, dan memulihkan среднее рангово е различие = 14,50) , hal = 0,049), tidak ada группы с плохим (средняя разница рангов = 10,21, p = 0,373) dan с хорошим вымиранием (средняя разни ца рангов = 4,607, p > 0,999) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа с домашней клеткой (рис. 5A). Ada perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, ingatan rasa takut dan kelompok sel rumah pada ekspresi aCLA Fos (X2(3) = 8.455, p = 0.036), sehingga kelompok ingatan rasa takut (rata-rata perbedaan peringkat = 14.50), p = 0.049 ), tetapi kelompok dengan kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 10,21, p = 0,373) dan baik (perbedaan peringkat rata-rata = 4,607, p > 0,999) menunjukkan ekspresi Fos yang lebih tinggi daripada kelompok sel asal (Gbr. 5A). .Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam (rs = 0,036, p = 0,876) (Gambar 5B) atau ekspresi Fos dalam sel aferen IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) dan recall kepunahan (Gambar 5B)..5D), juga tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di aferen aCLA IL (X2(3) = 6.722, p = 0.081) (Gambar 5C)..). Selanjutnya terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, recall ketakutan, dan kandang kandang pada ekspresi Fos di mCLA (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) sehingga kelompok kepunahan baik (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) maupun kelompok yang mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) tidak menunjukkan ekspresi Fos yang lebih signifikan di mCLA. relatif terhadap kelompok kandang rumah (Gbr. 5E). Selanjutnya terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, recall ketakutan, dan kandang kandang pada ekspresi Fos di mCLA (X2 (3) = 10.12, p = 0.018) sehingga kelompok kepunahan baik (Mean Rank Diff . = 12.93, p = 0.038), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 5.143, p > 0.999) maupun kelompok yang mengingat rasa takut (Mean Rank Diff. = 14.00, p = 0.063) tidak menunjukkan ekspresi Fos yang lebih signifikan di mCLA. relatif terhadap kelompok kandang rumah (Gbr. 5E). Значительная рница между г со с хош p уоши шней клеткой В экспрессиonya fos В mcla (x2 (3) = 10,12, p = 0,018), так чч зззologis уошицошицанandi уancing уошошананandi уancing уошошананandi уancing уошшшанandi уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing уancing (сх. рангов . = 12,93, p = 0,038), bukan nilai tertinggi (nilai rata-rata = 5,143, p > 0,999), bukan . руппы отзыва страха (средняя ранговая разница = 14,00, p = 0,063) не показали значительно большей экспрессии Fos di mCLA. Kemudian terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan baik, kepunahan buruk, ingatan ketakutan dan kelompok sel rumah pada ekspresi mCLA Fos (X2(3) = 10.12, p = 0.018), sehingga kelompok kepunahan baik (rata-rata selisih rangking = 12.93, p = 0,038), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 5,143, p > 0,999) maupun kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 14,00, p = 0,063) menunjukkan ekspresi Fos yang jauh lebih besar di mCLA.dibandingkan dengan kelompok kandang rumah (Gambar 5E).接下来 , 在 Mcla 中 的 fos 表达 , 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着差异 （x2 （3） = 10,12 , p = 0,018） , 良好 （（（（（（ （（（ Rata-rata Perbedaan Peringkat.= 12,93, p = 0,038), dengan mCLA 中,弱消退（平均秩差= 5,143,p > 0,999）和恐惧回忆组（平均秩差= 14,00,p = 0,06 3）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 = 12,93, p = 0,038) , 在 在 Mcla 中 , 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5.143 , p> 0.999） 和 回忆组 （平均秩差 = 14,00 , p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Дале secara в э э iden ээдалась значительная рницц ужж гой ухж уа уа уа) групой с о отзывом о с и г г г г гAN д д домашней кл г к д д00, p = 0,018), так, груilan хош хош хо х х х х хuman хош х х х хail хош х х х гail хош. угашения (средняя разность рангов = 12,93, p = 0,038), tidak ada dalam mCLA угасание (средняя разница рангов = 5, 143, p > 0,999), bukan группа отзыва страха (средняя разница рангов = 14,00, p = 0,999) = 0,063) показали лучшую экспрессию Много Fos по сравнению с группой с домашней клеткой (Рисуnomic 5E). Lebih lanjut, terdapat perbedaan yang signifikan dalam ekspresi Fos di mCLA antara kelompok kepunahan baik, kelompok kepunahan buruk, kelompok umpan balik rasa takut, dan kelompok sel rumah (X2(3) = 10.12, p = 0.018), dengan demikian, kelompok yang baik kepunahan (perbedaan peringkat rata-rata = 12,93, p = 0,038), tetapi dalam mCLA tidak ada kepunahan lemah (perbedaan peringkat rata-rata = 5,143, p > 0,999) maupun kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 14,00, p = 0,999) = 0,063) menunjukkan hasil yang lebih baik Ekspresi Multi Fos dibandingkan dengan kelompok sel asal (Gambar 5E).Namun, ekspresi Fos global dalam mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (Gambar 5F) atau dalam sel IL mCLA aferen (rs = -0,121, p = 0,602) dan recall kepunahan (Gambar 5H), tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan sel rumah untuk ekspresi Fos dalam sel aferen IL mCLA (X2(3)=4.923, p=0.178) (Gambar 5G).
Aktivitas fos meningkat pada pertengahan klaustrum pada tikus dengan memori kepunahan yang baik.(A) Kelompok mengingat rasa takut, tetapi tidak pada kelompok lain, menunjukkan peningkatan aktivitas Fos dibandingkan dengan kelompok sel rumah di aCLA.(B) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aCLA dan penarikan kembali kepunahan.(C) Ekspresi Fos dalam sel aCLA aferen IL tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(D) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan recall kepunahan di aCLA.(E) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak pada kelompok lainnya, menunjukkan peningkatan aktivitas Fos di mCLA dibandingkan dengan kelompok sel asal.(F) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di mCLA.(G) Ekspresi Fos dalam sel aferen IL mCLA tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(H) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan recall kepunahan di mCLA.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean. *p <0,05. *p <0,05. *p < 0,05. *p <0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *p < 0,05. *p <0,05.
Kemudian, aktivitas Fos spesifik proyeksi global dan IL dalam mBLA dan pBLA dianalisis pada semua kelompok tikus.Tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di mBLA (X2(3)=0.944, p=0.815) (Gambar 6A).Juga tidak ada perbedaan yang signifikan antara kelompok dengan regresi yang baik, regresi yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan ekspresi Fos sel rumah pada sel aferen IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (Gambar 6C).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Gambar 6B) dan ekspresi Fos dalam sel aferen IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Gambar 6D) dan penarikan kembali kepunahan.Juga tidak ada perbedaan yang signifikan dalam kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, memori rasa takut, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di pBLA (X2(3) = 4.246, p = 0.236) (Gambar 6E), dan juga tidak ada perbedaan yang signifikan di pBLA Bagus.kepunahan, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel asal dalam ekspresi Fos dalam sel aferen IL (X2(3)=1,954, p=0,582) (Gambar 6G).Akhirnya, ekspresi Fos global dalam pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Gambar 6F) dan ekspresi Fos dalam sel aferen pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) dan penarikan kembali kepunahan (Gambar 6H).
Perbedaan individu dalam reproduksi kepunahan tidak dipetakan pada perbedaan ekspresi Fos di amigdala basolateral.(A) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di mBLA.(B) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di mBLA.(C) Ekspresi Fos dalam sel aferen IL mBLA tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(D) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel aferen IL dan recall kepunahan di mBLA.(E) Tidak ada perbedaan antarkelompok yang signifikan dalam ekspresi Fos di pBLA.(F) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di pBLA.(G) Ekspresi Fos dalam sel IL pBLA aferen tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(H) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dalam sel aferen IL dan recall kepunahan di pBLA.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean.
Akhirnya, aktivitas Fos spesifik proyeksi global dan IL dianalisis dalam mvHPC dan pvHPC pada semua tikus. Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan yang takut, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mvHPC (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) sehingga kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 13.29 , p = 0,031), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) maupun ingatan rasa takut (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos dibandingkan kelompok kandang kandang (Gbr. 7A). Terdapat perbedaan yang signifikan antara kelompok kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan yang takut, dan kelompok kandang dalam ekspresi Fos di mvHPC (X2 (3) = 8.056, p = 0.045) sehingga kepunahan yang baik (Mean Rank Diff. = 13.29 , p = 0,031), tetapi baik kelompok kepunahan yang buruk (Mean Rank Diff. = 6.857, p > 0.999) maupun ingatan rasa takut (Mean Rank Diff. = 8.000, p = 0.864) menunjukkan lebih banyak ekspresi Fos dibandingkan kelompok kandang kandang (Gbr. 7A). Между группами с хорошим угасанием, плохим угашением, отзывом страха и домашними клетками наблюдалась значительная разница в экспрессии Fos в mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так что хорошее угасание (средняя ранговая разница = 13,29) , p = 0,031), но ни в гппах с п пихим уасанием (с с р р - сз рз рз рз рз рз рз вз вз вз вз вз вз вз вз вз вз вз вз вц вц вц в в в в в в в в в в в ановая рница = 8.000, p = 0,864) экспресontoh Fos ы Pertanyaan клеткой (рис. 7А). Terdapat perbedaan ekspresi mvHPC Fos yang signifikan antara kelompok dengan kepunahan baik, kepunahan buruk, recall ketakutan, dan sel rumah (X2(3) = 8.056, p = 0.045), sehingga kepunahan baik (rata-rata selisih peringkat = 13.29), p = 0,031), tetapi baik pada kelompok kepunahan yang buruk (perbedaan peringkat rata-rata = 6,857, p > 0,999) maupun pada kelompok mengingat rasa takut (perbedaan peringkat rata-rata = 8,000, p = 0,864) ekspresi Fos lebih tinggi dibandingkan pada kelompok asal.sel (Gbr. 7A). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异（X2 (3) = 8,056, p = 0,045 ）,因此良好消退（平均秩差= 13,29） ,p = 0,031 ）,但无论是弱消退（平均秩差= 6,857,p > 0,999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8,000,p = 0,864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8,056 , p = 0,045） , 良好 （（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） , 但 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 , p> 0,999） 还是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8,000 , p = 0,8 64） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ））））））））））））））））））））））））））））））））））） Иелась значительная рница между грett mvhpc (x2 (3) = 8.056, p = 0,045) и, следовательно, хорошаancing ррнancing (срнancing рница рангоВ = 13,29), p = 0,031), tidak ada nilai yang sama (nilai rata-rata = 6,857, p > 0,999) dan lainnya хе (средняя разница рангов = 8,000, p = 0,864) показали более высокую экспрессию Fos, чем группа в домашней клетке (рис. 2). Ada perbedaan yang signifikan antara kelompok baik, buruk, ingatan takut, dan sel rumah untuk ekspresi Fos di mvHPC (X2(3) = 8.056, p = 0.045) dan oleh karena itu regresinya baik (perbedaan peringkat rata-rata = 13.29), p = (Gbr. 2).7A).Namun tidak terdapat perbedaan yang signifikan (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Gambar 7C).Selain itu, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global dalam mvHPC (rs = -0.233, p = 0.309) (Gambar 7B) dan ekspresi Fos dalam sel IL aferen mvHPC (rs = 0.056, p = 0.810) (Gambar 7D).dan laporan tentang hilangnya.Lebih lanjut, tidak ada perbedaan yang signifikan antara kepunahan yang baik, kepunahan yang buruk, ingatan akan rasa takut, dan kelompok sel rumah dalam ekspresi Fos di pvHPC (X2(3) = 3.623, p = 0.353) (Gambar 7E), dan tidak ada perbedaan yang signifikan.perbedaan dalam regresi ekspresi Fos yang baik pada sel IL aferen pvHPC, regresi buruk, memori rasa takut, dan kelompok sel rumah (X2(3)=3,871, p=0,276) (Gbr. 7G).Akhirnya, tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos global pvHPC (rs = −0.127, p = 0.584) (Gambar 7F) dan ekspresi Fos dalam sel pvHPC aferen IL (rs = 0.176, p = 0.447) dan penarikan kembali kepunahan (Gambar 7F ).7 jam).
Ekspresi Fos meningkat di hipokampus ventral tikus, menunjukkan kepunahan ingatan yang baik.(A) Kelompok yang sudah punah, tetapi tidak pada kelompok lainnya, menunjukkan peningkatan ekspresi Fos di mvHPC dibandingkan dengan kelompok sel asal.(B) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan recall kepunahan di mvPHC.(C) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen mvHPC tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(D) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan recall kepunahan di mvHPC.(E) Tidak ada perbedaan yang signifikan antar kelompok dalam ekspresi Fos di pvHPC.(F) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos dan ingatan kepunahan di pvHPC.(G) Ekspresi Fos dalam sel IL aferen pVHPC tidak berbeda secara signifikan antar kelompok.(H) Tidak ada korelasi yang signifikan antara ekspresi Fos di aferen IL dan recall kepunahan di pvHPC.Bilah kesalahan mewakili deviasi standar mean. *p <0,05. *p <0,05. *p < 0,05. *p <0,05. *p < 0,05。 *p < 0,05。 *p < 0,05. *p <0,05.Analisis utama kami untuk semua wilayah menunjukkan perbandingan pada tiga tingkat di sepanjang sumbu anteroposterior, meskipun kami juga menganalisis setiap wilayah yang runtuh di sepanjang sumbu anteroposterior.Hasil analisis tersebut disajikan pada tabel 1.
Di sini kami menguji apakah perbedaan individu dalam ingatan akan kepunahan akan tercermin dalam pola aktivitas aferen yang berbeda di korteks limbik bawah.Untuk tujuan ini, kami menilai aktivitas Fos dalam proyeksi IL dari thalamus paraventrikular, klaustrum, tonsil basolateral, dan hipokampus ventral setelah pemutaran ulang kepunahan.Pada sel yang memproyeksikan IL, kami menemukan aktivitas yang lebih tinggi di wilayah posterior PVT pada tikus yang menunjukkan daya ingat kepunahan yang baik dibandingkan dengan tikus dengan kepunahan yang buruk.Tidak ada perbedaan aferen IL dari nukleus klavikula, hipokampus ventral, atau tonsil basolateral.Selain sel-sel yang memproyeksikan IL, peningkatan aktivitas saraf diamati di area tertentu dari klaustrum tikus dan hipokampus ventral dengan resolusi yang baik.Hasil kami menunjukkan bahwa memori kepunahan yang berhasil diatur oleh proyeksi PVT spesifik ke sel-sel yang menargetkan IL dan non-IL di klaustrum dan hipokampus ventral.
Kami menemukan bahwa prediksi PVT IL aktif pada tikus yang menunjukkan daya ingat kepunahan yang baik, hal ini konsisten dengan penelitian terbaru yang menunjukkan bahwa PVT diperlukan untuk mengingat kepunahan.Studi ini tidak menggunakan manipulasi spesifik subwilayah, namun menunjukkan bahwa proyeksi PVT pada amigdala sentral lateral dan proyeksi IL pada PVT diperlukan untuk mereproduksi kepunahan.Hasil kami menunjukkan bahwa, selain rantai IL-PVT-CeL, entri pasca-PVT ke IL mungkin juga diperlukan untuk penarikan kembali quench.Jadi, ternyata koneksi IL eferen dan aferen terlibat dalam reproduksi kepunahan.Langkah penting berikutnya adalah menentukan penyebab pPVT memberi sinyal reproduksi kepunahan pada tingkat sirkuit saraf.Selain hubungannya dengan IL, penelitian pelacakan saluran sebelumnya31,32 telah menunjukkan bahwa pPVT menerima masukan dari ventral periaqueductal grey (vPAG), yang dikaitkan dengan pembelajaran kepunahan33,34,35,36.Meskipun peran vPAG dalam penarikan kembali kepunahan belum diketahui, prediksi pPVT oleh vPAG merupakan kandidat yang menarik karena kepadatannya dan keterlibatan kedua wilayah dalam menghasilkan bukti ketakutan akan kepunahan sebelumnya.
Aspek penting lainnya dari hasil PVT kami adalah bahwa hasil tersebut terspesialisasi di sepanjang sumbu anterior-posteriornya.Yang mengejutkan, aktivitas saraf dari proyeksi PVT di IL berkorelasi dengan keadaan perilaku yang berlawanan, sehingga aktivitas proyeksi pra-PVT di IL dikaitkan dengan ingatan akan rasa takut, sedangkan proyeksi pPVT aktif setelah kepunahan ingatan berhasil (yaitu, rasa takut).Heterogenitas fungsional dalam PVT ini tidak mengherankan mengingat penelitian sebelumnya [dibahas dalam 37].Contoh mencolok dari distribusi fungsional pada PVT baru-baru ini muncul dalam sebuah penelitian yang mengkarakterisasi sifat-sifat tipe sel tertentu pada PVT.Studi ini menunjukkan bahwa sel-sel dopamin yang mengekspresikan DRD2 sebagian besar diekspresikan dalam pPVT, mempersarafi korteks kaki depan, dan merespons rangsangan yang tidak menyenangkan.Populasi sel kedua sebagian besar diekspresikan dalam aPVT dan menandai transisi ke keadaan gairah fisiologis rendah dan menginervasi korteks ekstremitas bawah.Hasil kami hampir tidak sesuai dengan pola ini, karena sel aPVT yang memproyeksikan IL aktif selama ingatan akan rasa takut, sementara proyeksi pPVT aktif dan hewan menunjukkan tingkat ketakutan yang rendah.Setidaknya ada dua kemungkinan penjelasan atas perbedaan yang tampak ini.Pertama, tipe sel yang diidentifikasi tidak terletak secara eksklusif di satu lokasi anterior-posterior TVV.Dengan demikian, sel pPVT yang memproyeksikan IL aktif pada tikus dengan memori kepunahan yang baik mungkin termasuk dalam kelas sel yang lebih mungkin terdeteksi dalam aPVT dan menandakan transisi ke keadaan gairah rendah.Hal yang sama mungkin berlaku untuk sel-sel yang memproyeksikan IL dalam aPVT yang diaktifkan setelah memori rasa takut.Kedua, studi penelusuran sebelumnya telah mengidentifikasi keberadaan pPVT yang memproyeksikan IL3, meskipun beberapa tampaknya berasal dari sel yang mengandung DRD2, jenis sel lain mungkin memproyeksikan ke IL dan menjadi aktif setelah reproduksi quenching berhasil.
Meskipun tujuan penelitian ini adalah untuk mengidentifikasi perbedaan antara tikus yang menunjukkan fenotip kepunahan yang berbeda, percobaan ini juga mengungkapkan data baru terkait mekanisme memori rasa takut.Menariknya, kami menemukan peningkatan aktivitas Fos di CLA anterior pada tikus dengan memori rasa takut.
Klavikula diposisikan sebagai pusat komunikasi kortikal dan terlibat dalam proses mulai dari integrasi sensorik hingga perhatian dan tidur40,41,42,43.Ada bukti terbatas tentang bagaimana klaustrum terlibat dalam pengondisian rasa takut atau ekspresi ketakutan, namun penelitian sebelumnya menunjukkan bahwa ekspresi ketakutan kontekstual terlibat dalam aktivitas Fos di klaustrum.Baru-baru ini dilaporkan bahwa penghambatan proyeksi atresia ke korteks entorhinal selama pengkondisian rasa takut kontekstual mengganggu pembentukan memori jangka panjang, meskipun kebutuhannya akan ekspresi rasa takut belum diuji.Dalam studi yang sama, peningkatan aktivasi Fos diamati ketika hewan terpapar pada lingkungan baru dibandingkan dengan tikus yang terpapar pada lingkungan familiar.Dengan mengingat hal ini, aktivasi CLA yang kami laporkan di sini mungkin disebabkan oleh paparan kamera baru selama pengujian, bukan karena ketakutan akan penarikan kembali itu sendiri.Untuk lebih akurat mengkarakterisasi fungsi kuncian dalam ketakutan dan pemrosesan situasional, penelitian di masa depan harus menggunakan manipulasi kuncian yang ditargetkan.
Meskipun penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa PVT dikaitkan dengan ekspresi memori rasa takut,45,46,47 kami tidak mengamati adanya perubahan dalam ekspresi Fos total pada tikus ketika mereka mengingat rasa takut 48 jam setelah pengkondisian.Perbedaan ini dapat dijelaskan oleh beberapa faktor, termasuk penelitian sebelumnya yang menguji rasa takut terhadap isyarat yang berbeda dalam konteks yang sama di mana pengondisian dilakukan, sedangkan dalam percobaan kami, pengujian dilakukan di ruangan baru.Selain itu, kami melakukan eutanasia pada hewan 60 menit setelah pengujian, sedangkan pekerjaan sebelumnya menggunakan waktu 90 menit.Terakhir, pada penelitian sebelumnya, pengujian dilakukan di ruangan di mana hewan dapat merespons dengan nafsu makan, sedangkan dalam penelitian kami, tikus diuji tanpa respons nafsu makan.Meskipun hal ini memungkinkan adanya penghambatan terkondisi pada tingkat tertentu, terdapat bukti bahwa membiarkan hewan menghambat tekanan untuk mendapatkan makanan sambil menguji apakah isyarat rasa takut mereka akan menciptakan konflik motivasi (yaitu, rasa takut versus imbalan), yang merupakan faktor pendorong utama.partisipasi PVT48, 49. .
Amigdala basolateral diketahui terlibat dalam timbulnya kepunahan rasa takut50,51 dan terdapat bukti bahwa proyeksi BLA ke IL juga terlibat dalam proses ini23.Namun, tidak jelas apakah BLA dan koneksinya terlibat dalam kembalinya kepunahan.Studi pencitraan23,28 menunjukkan peningkatan aktivitas BLA pada hewan yang mengingat ingatan yang memudar.Meskipun penelitian kami sebelumnya menunjukkan tidak ada perbedaan dalam aktivasi BLA antara tikus kepunahan baik dan buruk, hasil kami di sini menunjukkan bahwa penarikan kembali kepunahan secara umum tidak mempengaruhi BLA atau aktivasi dalam memprediksi BLA IL.Konsisten dengan temuan kami, meskipun studi manipulasi sirkuit menunjukkan bahwa masukan IL ke BLA penting untuk pembelajaran kepunahan, hal tersebut tidak diperlukan untuk mengingat kembali kepunahan.Namun, peran BLA tidak dapat sepenuhnya diabaikan karena bukti terbaru menunjukkan bahwa jenis sel tertentu dalam BLA diperlukan untuk mereproduksi kepunahan.
Khususnya, mengingat rasa takut tidak menghasilkan aktivasi Fos di BLA, karena penelitian lesi, obat, dan pencitraan sebelumnya telah mengimplikasikan area ini dalam ekspresi rasa takut dan/atau konsolidasi kembali rasa takut setelah pengambilan kembali54,55,56,57.Data yang disajikan di sini menggabungkan subnukleus basal dan lateral amigdala, dan data sebelumnya menunjukkan bahwa ekspresi rasa takut mendorong aktivitas Fos di sisi dorsal nukleus lateral.Kami menganalisis data dasar dan data lateral secara terpisah, namun tidak ada perbedaan dalam kedua kasus tersebut (data tidak ditampilkan) dan kedua area tersebut tidak disertakan dalam data yang kami sajikan di sini.Kami tidak menganalisis subwilayah amigdala lateral, sehingga perubahan spesifik pada area ini mungkin tertutupi.Kemungkinan lain tidak adanya perubahan aktivitas Fos di BLA adalah karena waktu ingatan ketakutan dibandingkan dengan pengkondisian.Beberapa penelitian sebelumnya telah menunjukkan bahwa kontribusi BLA terhadap ekspresi ketakutan menurun seiring waktu setelah pengkondisian, sehingga ekspresi bergantung pada BLA pada 24 jam pasca pengkondisian tetapi independen pada 7 hari (ref. 45 tetapi lihat 58).terjadi 48 jam setelah pelatihan, sehingga kurangnya perubahan dalam aktivitas Fos pada saat ini kemungkinan besar mencerminkan perubahan yang bergantung pada waktu dalam partisipasi BLA dalam ekspresi rasa takut.
Akhirnya, kami menemukan bukti bahwa memori kepunahan berhasil dikaitkan dengan hipokampus ventral.Ini adalah karakteristik vHPC “menengah” karena pola yang sama tidak terlihat di wilayah posterior.Konsisten dengan penelitian sebelumnya, kami tidak menemukan perubahan dalam aktivasi Fos di vHPC ILS aferen.Terdapat bukti substansial bahwa vHPC28,60,61 diperlukan untuk aktualisasi ketakutan ketika CS terjadi di luar konteks di mana pemudaran terjadi, dan hal ini setidaknya sebagian bergantung pada masuknya vHPC ke IL13.Berdasarkan hasil sebelumnya, kami memperkirakan pemudaran yang buruk dikaitkan dengan peningkatan prediksi aktivitas IL vHPC.Namun, hal ini tidak terjadi karena tidak ada perbedaan dalam aktivitas Fos dalam vHPC berlabel retrograde yang diproyeksikan IL atau sel tidak berlabel dalam vHPC.Hal ini menunjukkan bahwa ketidakmampuan mengingat pemudaran dalam konteks pemudaran dapat memicu mekanisme yang berbeda dari rasa takut akan pembaruan.
Penting untuk mencatat beberapa keterbatasan desain dan analisis yang melekat dan bagaimana hal tersebut mempengaruhi kesimpulan kita.Pertama, kami membagi hewan menjadi sepertiga atas dan bawah, dan tikus menjadi “baik” dan “buruk” berdasarkan skor ingatan kepunahan.Hal ini dilakukan untuk menghindari skema kelompok yang membagi hewan menjadi kelompok terpisah dari tengah sebaran, atau skema kelompok yang mengecualikan hewan dari tengah sebaran, seperti pemisahan berdasarkan median atau perbandingan sepertiga bagian atas dan bawah tikus. .kami ingin menghindari situasi ini karena pembagian median tidak mencerminkan variabilitas respons manusia terhadap trauma yang kami coba modelkan.Selain itu, meskipun membandingkan sepertiga bagian atas dan bawah tikus memungkinkan kita membandingkan kelompok dengan ukuran yang sama, pendekatan ini mengabaikan hewan yang menjadi pusat distribusi dan tidak secara akurat mencerminkan variabilitas reaksi terhadap cedera.Meskipun metode kami mungkin mengalami masalah dengan varians yang heterogen dan membandingkan kelompok dengan ukuran sampel yang tidak sama, metode ini menangkap apa yang kami coba tiru dengan lebih baik daripada metode alternatif.
Hasil yang disajikan di sini membantu kita lebih memahami bagaimana perbedaan individu dalam ingatan kepunahan tercermin dalam perbedaan aktivitas sirkuit saraf.Temuan kami mungkin relevan dengan gangguan stres pasca-trauma, yang diketahui berhubungan dengan rasa takut yang berlebihan dan ketidakmampuan untuk menghilangkan respons rasa takut.Kami menunjukkan bahwa perbedaan dalam ingatan kepunahan dikaitkan dengan perbedaan aktivitas saraf intrinsik dan ekstrinsik yang diproyeksikan ke IL.Perbedaan-perbedaan ini tersebar di berbagai wilayah di sepanjang sumbu anteroposterior, yang semakin menyoroti pentingnya menilai fungsi otak pada tingkat subregional.Kerugian dari metode saat ini termasuk relevansi penelitian dan fokus pada hewan pengerat jantan.Penelitian di masa depan harus menentukan mekanisme neurobiologis yang mendasari pembelajaran kepunahan pada hewan pengerat betina dan menggunakan metode untuk menarik kesimpulan sebab akibat.
Kumpulan data yang digunakan dan/atau dianalisis dalam penelitian ini tersedia dari masing-masing penulis berdasarkan permintaan yang masuk akal.
Pavlov IP Conditioning: studi tentang aktivitas fisiologis korteks serebral.(Pers Universitas Oxford, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Menerapkan prinsip pembelajaran pada pengobatan reaksi pasca-trauma. Rothbaum, BO, & Davis, M. Menerapkan prinsip pembelajaran pada pengobatan reaksi pasca-trauma.Rotbaum BO dan Davis M. Menerapkan prinsip pembelajaran pada pengobatan reaksi pasca-trauma.Rotbaum BO dan Davis M. Penerapan prinsip pembelajaran dalam pengobatan reaksi pasca trauma.Install.Perguruan Tinggi New York.ilmu.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Tinjauan terapi paparan: standar emas untuk pengobatan PTSD. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Tinjauan terapi paparan: standar emas untuk pengobatan PTSD.Rauch SA, Eftekhari A. dan Ruzek DI Tinjauan terapi pemaparan: pengobatan standar emas untuk gangguan stres pasca trauma. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSD 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Ulasan terapi paparan: Standar emas untuk pengobatan PTSD.Rauch, SA, Eftekhari, A. dan Ruzek, DI Tinjauan terapi pemaparan: pengobatan standar emas untuk gangguan stres pasca trauma.J.Rehabilitasi.pengembangan waduk 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Terapi pemaparan panjang: masa lalu, sekarang dan masa depan.Penindasan Kecemasan 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Tuan Millard dkk.Penyebab hilangnya memori yang eksistensial dan didapat pada gangguan stres pasca-trauma: temuan dari penelitian kembar.J.Psikiater.tangki penyimpanan.42(7), 515-520 (2008).
Tuan Millard dkk.Dasar neurobiologis dari ketidakmampuan mengingat ingatan yang memudar pada gangguan stres pasca-trauma.biologi.Psikologi.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: Mengisolasi reaktivitas rasa takut dan fenotip pemulihan rasa takut. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: Mengisolasi reaktivitas rasa takut dan fenotip pemulihan rasa takut.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. dan LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: membedakan fenotipe reaktivitas rasa takut dan pemulihan rasa takut. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: isolasi respons rasa takut dan tabel pemulihan rasa takut.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. dan LeDoux, JE Perbedaan individu dalam ketakutan: isolasi respons rasa takut dan fenotip pemulihan rasa takut.J.Trauma.tekanan 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG Respon mengejutkan akustik pada tikus memprediksi variasi antar individu dalam kepunahan rasa takut. Russo, AS & Parsons, RG Respon mengejutkan akustik pada tikus memprediksi variasi antar individu dalam kepunahan rasa takut.Russo, AS dan Parsons, RG Respon mengejutkan akustik pada tikus memprediksi perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS dan Parsons, RG Respon mengejutkan akustik pada tikus memprediksi perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut.Neurobiologi.belajar.Penyimpanan.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Variabilitas individu dalam mengingat kepunahan rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan mitogen di korteks infralimbik. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Variabilitas individu dalam mengingat kepunahan rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan mitogen di korteks infralimbik.Russo, AS, Lee, J. dan Parsons, RG Variabilitas individu dalam kepunahan ingatan rasa takut dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan mitogen di korteks infralimbik. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Ingatan akan memudarnya rasa takut terkait dengan perbedaan individu dalam fosforifikasi jaringan perifer.Russo, AS, Lee, J. dan Parsons, RG Perbedaan individu dalam kepunahan rasa takut selama mengingat dikaitkan dengan fosforilasi protein kinase yang diaktifkan mitogen di korteks ekstremitas bawah.Psikofarmakologi 236(7), 2039–2048 (2019).